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公司產(chǎn)品具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
氨芐青霉su溶液 | 10ml | FS-R6322 |
產(chǎn)品分類:抗生素
儲存條件:—20℃,避光,12個月
用途:細菌培養(yǎng)常用抗生素,用于配制含氨芐的LB或LB平板等。干擾肽聚糖的交聯(lián)從而抑制細胞壁的合成。
注意事項:無菌溶液。工作濃度為50-100ug/ml。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用xi 鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
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Human Endostatin elisa kit 人ELISA試劑盒 96T/48T
human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2 ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
APC70 轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體
ACTBL1 卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體
ANKRD33B 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體
APOC3 載脂蛋白C3抗體
Apoptosis enhancing nuclease 細胞凋亡增強核酸酶抗體
ATAD5 染色體脆弱性相關基因抗體
phospho-AKT (Ser473) 磷酸化蛋白激酶B抗體
ATP7B 銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)β鏈抗體
ACSF4 酰基蛋白2抗體
AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗體
ARL6 二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體
ANO9 p53誘導蛋白5抗體
ANKRD5 錨蛋白重復域5抗體
ACCN2 腦鈉通道蛋白2抗體
ACCN4 腦鈉通道蛋白4抗體
ACCN5 小腸鈉通道蛋白5抗體
氨芐青霉su 溶液APXL APXL蛋白抗體
ASIC3 酸敏感離子通道蛋白3抗體
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。