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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
孔雀綠指示劑 | 100ml | FS-R6876 |
產(chǎn)品分類：指示劑
儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月
用途：?jiǎn)我凰釅A指示劑，也稱作孔雀石綠指示劑
注意事項(xiàng)：孔雀綠第一變色范圍：pH0.13-0.20,顏色由黃色變淡綠色；第二變色范圍：pH11.5-13.2,顏色由藍(lán)綠色變?yōu)闊o(wú)色。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用xi鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
酯封端左旋聚乳(重均分子量137-170萬(wàn)) Nordihydrocapsaicin抑瘤M抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量17-26萬(wàn)) 4-(Methylamino)-antipyrine抑瘤M受體抗體包裝25g
酯封端左旋聚乳(重均分子量170-206萬(wàn)) Hydrazine sulfate鋅指蛋白339抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量206-288萬(wàn)) Hydrazine sulfate氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量26-36萬(wàn)) Cyclandelate氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬(wàn)) Nitrilotriacetic acid固生蛋白M抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量36-48萬(wàn)) 1,3- Propylene Glycol末端多聚腺苷1蛋白抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量48-73萬(wàn)) Diethylene Glycol嗅球蛋白3抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量5.5-9 萬(wàn)) Chlorothiazide轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量73-102萬(wàn)) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量9-17萬(wàn)) Alkene轉(zhuǎn)錄因子OTX1+OTX2抗體包裝250mg
(3R,4R)-N,4-二基-1-(基)-3-... N-Methylparoxetine增食欲B/欲激B包裝5g
(R)-1-基-3-基丁基蒎烷二酯鹽鹽 Sevoflurane鳥(niǎo)脫羧抗體包裝100mg
1,2-二基-5-羥基-3-乙酯;比酯; DiaveridineO位N-乙酰葡萄糖OGT抗體包裝25mg
1,9-吡唑并蒽;SP600125 Mestanolone少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子1包裝25g
孔雀綠指示劑Fc GammaR I /CD64(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR I ) ELISA Kit G Fc段受體Ⅰ規(guī)格： 48T
GCP-2/CXCL6(Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2) ELISA Kit 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2規(guī)格： 48T
IFN- Omega (Human Interferon Omega ,IFN- Omega ) ELISA Kit 人ω干擾su規(guī)格： 48T
GlyCAM-1(Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1) ELISA Kit 人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子規(guī)格： 48T
IRF(Human interferon Regulatory Factor) ELISA Kit 人干擾su調(diào)節(jié)因子規(guī)格： 48T
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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