鈣熒光探針Fluo-8, AM實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鈣熒光探針Fluo-8, AM
貨號(hào)：FSP080
產(chǎn)品規(guī)格：1 mg/5×50 µg/10×50 µg/20×50 µg
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
人鈣結(jié)合蛋白（CR）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Pacific Blue^™ Conjugate)100 ul

人脯氨酸羥化酶（PHD）分析檢測(cè)試劑盒E4BP4/NFIL3 (D5K8O) Rabbit mAb100 ul

人分泌型免疫球蛋白A（SIgA）分析檢測(cè)試劑盒C-Reactive Protein (D1N1U) Rabbit mAb100 ul

人肺炎支原體抗體（MP-Ab）分析檢測(cè)試劑盒NAE1/APPBP1 (D9I4Z) Rabbit mAb100 ul

人肥胖抑制素（Obestatin）分析檢測(cè)試劑盒Spi-B (D3C5E) Rabbit mAb100 ul

人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2（TERF2）分析檢測(cè)試劑盒NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

人丁型肝炎病毒抗體（HDV antibody）分析檢測(cè)試劑盒TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb100 ul

人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體（PLP）分析檢測(cè)試劑盒GCKR (D1W9P) Rabbit mAb100 ul

人蛋白ATP1B4（ATP1B4）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

人蛋白 DJ-1（PARK7）分析檢測(cè)試劑盒XIAP (D2Z8W) Rabbit mAb100 ul

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3（MAPKAPK3）分析檢測(cè)試劑盒NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

人補(bǔ)體片斷4b（C4b）分析檢測(cè)試劑盒Spi-B (D4V9S) Rabbit mAb100 ug

人丙酸諾龍/丙酸去甲睪酮（NP）分析檢測(cè)試劑盒SRC-1 Blocking Peptide100 ul

人白介素13（IL-13）分析檢測(cè)試劑盒Caspase-11 (17D9) Rat mAb100 ul

人α肌動(dòng)蛋白（α Actin）分析檢測(cè)試劑盒TopBP1 (D8G4L) Rabbit mAb100 ul

人αL巖藻糖苷酶（AFU）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-EGF Receptor (Thr678) Antibody100 ul

人Q熱科克斯體1（Q fever）抗體（IgG）分析檢測(cè)試劑盒CD36 (D8L9T) Rabbit mAb100 ug
鈣熒光探針Fluo-8, AMStreptomyces│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生理活性物質(zhì)，次核苷酸脫氫酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0038生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Bacillus│thuringiensis subsp. japanensis et al.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 30存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Planomicrobium│sp.分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性培養(yǎng)基: 511生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Pleurotus│nebrodensis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃

Thermoactinomyces│sp.分離基物: 樹根部土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0904生長(zhǎng)條件: 55℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Multiclavula│mucida (Pers.) R.H. Petersen分離基物: 石櫟林下斜面培養(yǎng)物模式菌株: yes培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Monascus│anka斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 醬油、腐乳培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Penicillium│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

pleurotus│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法