ELISA底物緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-OR4F17 Antibody大鼠6酮前列腺素F1a
Anti-OR4F4 Antibody人白介素16
Anti-OR4K2 Antibody小鼠因子
Anti-OR4K14 Antibody大鼠戊糖素
Anti-OR4K17 Antibody人白介素13
Anti-OR4L1 Antibody小鼠抗/血管加壓素/精加壓素
Anti-OR4K3

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

儲存條件：4℃,12個月

用途：主要用于ELISA實驗中配制鄰苯二胺(OPD)顯色液與氧化劑(如雙氧水)一起發(fā)生顯色反應(yīng)

注意事項：主要由磷酸氫er鈉、檸檬酸、防腐劑等組成

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

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尖鐮孢古巴?；蛯m頸黏液蛋白相關(guān)蛋白抗體Human SLC13A4 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)免疫試劑盒

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運動節(jié)桿菌流感病H3N7血凝抗體Human SIX5 ELISA Kit大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)免疫試劑盒

Rhizobium multihospitium流感病H3N1血凝抗體Human SKIL ELISA Kit大鼠c-jun 免疫試劑盒

黑曲霉同源盒蛋白HoxB3抗體Human SIX4 ELISA Kit大鼠c-fos 免疫試劑盒

產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型遺傳性血色病蛋白相關(guān)蛋白1抗體Human SIX5 ELISA Kit大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷3磷脂酰轉(zhuǎn)移,線粒體(PGS1)免疫試劑盒

紋黑蛋巢甘油吸收/轉(zhuǎn)運蛋白GUP1抗體Human SKAP2 ELISA Kit大鼠CDCP1 免疫試劑盒

涅斯捷連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=4%科羅索

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%草質(zhì)苷

芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%異鼠李-3-O-葡萄糖苷
ELISA底物緩沖液TRH ELISA Kit  大鼠促jia狀腺su釋放激su規(guī)格： 48T

ATGA/TGAB ELISA Kit  大鼠抗jia狀腺球蛋白規(guī)格： 48T

CRH ELISA Kit  大鼠促腎上皮質(zhì)激su釋放激su規(guī)格： 48T

GnRH ELISA Kit  大鼠促性腺激su釋放激su規(guī)格： 48T

LTB4 ELISA Kit  大鼠白三烯B4規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。