磺基羅丹明B磺酰氯實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：磺基羅丹明B磺酰氯
貨號(hào)：FSP097
產(chǎn)品規(guī)格：100 mg
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子13（FGF-13）分析檢測(cè)試劑盒MST1 (D8B9Q) Rabbit mAb100 ul

小鼠白介素25（IL25/C19orf10）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-CD79A (Tyr182) (D1B9) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

小鼠β葡萄糖醛酸苷酶（βGD）分析檢測(cè)試劑盒TBC1D7 (D8K1Y) Rabbit mAb100 ul

小鼠α2抗纖溶酶（α2-AP）分析檢測(cè)試劑盒MED26 (D4B1X) Rabbit mAb100 ul

小鼠L選擇素（L-Selectin/CD62L）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-NuMA (Thr2055) Antibody100 ul

小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體（Flt3L）分析檢測(cè)試劑盒FoxO1 (D7C1H) Mouse mAb20 ul

小鼠FAM84A蛋白（FAM84A）分析檢測(cè)試劑盒FoxO1 (D7C1H) Mouse mAb100 ul

小鼠D-乳酸脫氫酶（D-LDH）分析檢測(cè)試劑盒Spry2 (D3G1A) Rabbit mAb100 ul

小鼠C肽（C-Peptide）分析檢測(cè)試劑盒Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

小鼠8異前列腺素（8-iso-PG）分析檢測(cè)試劑盒p95/NBS1 (D6J5I) Rabbit mAb100 ul

兔過氧化物酶體增殖物激活受體β（PPARβ）分析檢測(cè)試劑盒HCN2 (D1C6I) Rabbit mAb100 ul

兔叉頭框蛋白P3（FOXP3）分析檢測(cè)試劑盒Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb100 ul

山羊促生長(zhǎng)激素釋放激素（GHRH）分析檢測(cè)試劑盒CGRP (D5R8F) Rabbit mAb20 ul

人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）分析檢測(cè)試劑盒CGRP (D5R8F) Rabbit mAb100 ul

人紅細(xì)胞生成素受體（EPOR）分析檢測(cè)試劑盒EphB4 (D1C7N) Rabbit mAb100 ul

人核糖體蛋白S25（RPS25）分析檢測(cè)試劑盒Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb20 ul

人核糖核酸酶（RNASE1/RIB1/RNS1）分析檢測(cè)試劑盒Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb100 ul
磺基羅丹明B磺酰氯Escherichia│coli分離基物: 雞肝臟凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究教學(xué)分類培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Streptomyces│sp.分離基物: 腐殖質(zhì)土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Flavobacterium│sp.分離基物: 水樣/表層海水凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 污染物降解微生物/潛在石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

柱孢犁頭霉根狀變種種屬: Absidia│cylindrospora var. rhizomorpha凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Arthrobacter│subterraneus分離基物: 土壤凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 831生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 葉部斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Staphylococcus│sp.分離基物: 鹽堿土凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 331生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bacillus│funiculus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法

Acinetobacter│lwoffii分離基物: 沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自原油富集菌群培養(yǎng)基: 472生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。