詳細(xì)介紹
探針?lè)ǎ?/font>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):PI染色液(定制濃度1mg/ml)
貨號(hào):FSP171
產(chǎn)品規(guī)格:1 mL
分類(lèi):熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱(chēng)、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ梢杂赡约禾峁?,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
人B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31(BCAP31)分析檢測(cè)試劑盒Survivin (71G4B7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)分析檢測(cè)試劑盒SET7/SET9 Antibody20 ul
人25羥基維生素D3(25 HVD3)分析檢測(cè)試劑盒SET7/SET9 Antibody100 ul
犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)分析檢測(cè)試劑盒RecQ4 Antibody100 ul
犬S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)分析檢測(cè)試劑盒Grp75 Antibody100 ul
牛胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)分析檢測(cè)試劑盒MLK3 Antibody100 ul
牛胰島素(Insulin)分析檢測(cè)試劑盒Cripto Antibody (Mouse Specific)100 ul
大鼠抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)分析檢測(cè)試劑盒Bim Antibody100 ul
大鼠抗弓形蟲(chóng)IgM抗體分析檢測(cè)試劑盒Ring1A Antibody300 ul
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-PLCγ1 (Tyr783) Antibody100 ul
大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-PLCγ1 (Tyr783) Antibody20 ul
大鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-PLCγ1 (Tyr783) Antibody100 ul
大鼠鈣非依賴(lài)型磷脂酶A2(iPLA2)分析檢測(cè)試劑盒PLCγ1 Antibody100 ul
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4)分析檢測(cè)試劑盒MEP50 Antibody100 ul
大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)分析檢測(cè)試劑盒SET7/SET9 (C24B1) Rabbit mAb300 ul
大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb100 ul
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb20 ul
PI染色液(定制濃度1mg/ml)Streptomyces│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│subtilis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 苧麻脫膠。培養(yǎng)基: CM0050生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Pseudoalteromonas│sp.分離基物: 海藻表面凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 524生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Aspergillus│niger凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于棉布坯練。培養(yǎng)基: CM0085生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
大杯蕈種屬: Clitocybe│maxima斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研教學(xué)。培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃
Staphylococcus│aureus分離基物: 牛奶凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗藥性研究培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 35~40存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
Aspergillus│parasiticus分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于真菌毒素研究培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Penicillium│sp.分離基物: 枯枝枯葉凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生真菌毒素培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 26C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥