ATTO 488實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：ATTO 488
貨號(hào)：FSP215
產(chǎn)品規(guī)格：1mg/5mg/100mg
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
犬N端前心鈉肽（NT-ProANP）分析檢測(cè)試劑盒VEGF Receptor 3 (C82A2) Rabbit mAb100 ul

牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2（IGFBP-2）分析檢測(cè)試劑盒YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1（IGFBP-1）分析檢測(cè)試劑盒PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb20 ul

牛細(xì)胞角蛋白21-1片段（CYFRA21-1）分析檢測(cè)試劑盒PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb100 ul

貓游離*狀腺原氨酸（Free-T3）分析檢測(cè)試劑盒α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

馬窖蛋白Caveolin-1（CAV1）分析檢測(cè)試劑盒Drosha (D30F3) Rabbit mAb100 ul

馬17羥孕酮（17-OHP）分析檢測(cè)試劑盒MeCP2 (D4F3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

雞的牛血清白蛋白（BSA）分析檢測(cè)試劑盒eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAb20 ul

雞丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）分析檢測(cè)試劑盒eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAb100 ul

雞白介素3（IL-3）分析檢測(cè)試劑盒eIF3H (D9C1) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠抗凝血酶III（AT III）分析檢測(cè)試劑盒HIF-1β/ARNT (C15A11) Rabbit mAb100 ul

大鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）分析檢測(cè)試劑盒Acetyl-Histone H2B (Lys20) (D7O9W) Rabbit mAb100 ul

大鼠多藥耐藥蛋白1（ABCB1）分析檢測(cè)試劑盒Atg3 Antibody20 ul

大鼠單氧化酶（MAO）分析檢測(cè)試劑盒Atg3 Antibody100 ul

大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體（GNRHR-Ab）分析檢測(cè)試劑盒IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠促性腺激素釋放激素受體（GnRHR）分析檢測(cè)試劑盒IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠層粘蛋白α1（LAMA1）分析檢測(cè)試劑盒CTCF (D1A7) XP® Rabbit mAb100 ul
ATTO 488Acinetobacter│haemolyticus/genospecies 4分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)脂肪酶培養(yǎng)基: CM0033生長條件: 26-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Mycobacterium│tuberculosis凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長條件: 32℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bacillus cereus凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 細(xì)菌肥料（解磷）培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長條件: 30℃，好氧存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Pleurotus│ostreatus斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于食用菌。培養(yǎng)基: CM0017生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；定期移植法

Salmonella│paratyphi A分離基物: 血其他安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

印度斯坦鏈異壁菌種屬: Streptoalloteichus│hindustanus斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0239生長條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥

Rhizobium│sp.分離基物: 珍珠葉相思斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 63生長條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Rhizopus│stolonifer凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。