詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體 |
英文名稱 | Vibrio Parahemolyticus Polar flagellin B/D |
規(guī)格 | 0.1ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
低分子量激肽原檢測試劑盒Low Molecular Weight Kininogen 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
對氯苯丙氨酸檢測試劑盒para-chlorophenylalanine 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
多聚ADP核糖聚合酶-1檢測試劑盒Poly ADP ribose polymerase 1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
多聚組氨酸標簽檢測試劑盒HIS-Tag 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
多肽YY檢測試劑盒Peptide-YY 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
泛素C末端水解酶L1檢測試劑盒biquitin carboxyl-terminal esterase L1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
分泌成分檢測試劑盒secretory component 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
分泌型卷曲相關(guān)蛋白1檢測試劑盒secreted frizzled-related protein 1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
復(fù)制蛋白A檢測試劑盒replication protein A 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
鈣離子通道抗體檢測試劑盒voltage-gated calcium channel 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶1α檢測試劑盒calcium;calmodulin-dependent protein kinase-1α 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
甘胺酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒Glycine N-methyltransferase 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
肝;肌糖元檢測試劑盒Liver;Muscle Glycogencific 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
干擾素誘導(dǎo)T細胞趨化因子檢測試劑盒Interferon inducible T-cell Chemoattractant 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
高分子量激肽原檢測試劑盒High Molecular Weight Kininogen 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
谷氨酸受體1檢測試劑盒Glutamic acid Receptor 1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
谷氨酸受體2檢測試劑盒Glutamic acid Receptor 2 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
谷胱甘肽硒過氧化酶3檢測試劑盒Selenium glutathione peroxidase 3 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
骨成型蛋白受體1A檢測試劑盒Bone Morphogenetic Protein Receptor IA 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
骨成型蛋白受體Ⅱ檢測試劑盒Bone Morphogenetic Protein Receptor Ⅱ 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體血管緊張素I抗體Sagittatoside B中文名:箭藿苷B別名:分子式:C32H38O14
腎上腺髓質(zhì)素抗體(N端20肽)Poriol中文名:別名:6-Methylnaringenin分子式:C16H14O5
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Cirsimarin中文名:別名:Cirsitakaoside分子式:C23H24O11
芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體Plathymenin中文名:別名:6,7,3',4'-Tetrahydroxyflavane分子式:C15H12O6
腺苷A2A受體抗體Vitexin 2''-O-rhamside中文名:牡荊素鼠李糖苷別名:分子式:C27H30O14