Cy3雙酸實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：Cy3雙酸
貨號：FSP010
產(chǎn)品規(guī)格：5 mg/25 mg/50 mg
分類：熒光核酸試劑
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
大鼠活化蛋白C（APC）分析檢測試劑盒SimpleChIP® Human CDKN1B Promoter Primers500 ul

大鼠骨粘連蛋白（ON）分析檢測試劑盒SimpleChIP® Human EGR1 Intron 3 Primers100 ul

大鼠雌三醇（E3）分析檢測試劑盒DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb20 ul

GBC-SD（人膽囊癌細(xì)胞）現(xiàn)貨供應(yīng)DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb100 ul

HL-60（人早幼粒急性白血病細(xì)胞）說明書SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb100 ul

Lncap clone FGC（人前列腺癌細(xì)胞）現(xiàn)貨供應(yīng)ADAP Antibody1 Kit

豬β干擾素（IFN-β/IFNB）分析檢測試劑盒PhosphoPlus® Smad2 (Ser465/467) Antibody Duet100 ul

小鼠鐵蛋白（FE）分析檢測試劑盒MAML1 (D3E9) Rabbit mAb100 ug

小鼠糖皮質(zhì)激素受體β（GR-β）分析檢測試劑盒Phospho-Stat3 (Tyr705) Blocking Peptide100 ul

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α（GR-α）分析檢測試劑盒Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)100 ul

小鼠可溶性Toll樣受體2（sTLR2）分析檢測試劑盒Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (APC Conjugate)100 ul

小鼠芳香酶分析檢測試劑盒XPD (D3Z6I) Rabbit mAb100 ug

小鼠成纖維細(xì)胞生長因子4（FGF4）分析檢測試劑盒Human IL-4 Neutralizing (D20H1) Rabbit mAb100 ul

小鼠白介素29（IL-29）分析檢測試劑盒LIN28B (D4H1) Rabbit mAb100 ul

豚鼠端粒酶（TE）分析檢測試劑盒BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb20 ul

人己糖激酶3（HK3）分析檢測試劑盒BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb100 ul

人激肽釋放酶8（KLK 8）分析檢測試劑盒COX IV (4D11-B3-E8) Mouse mAb300 ul
Cy3雙酸戴爾根霉種屬: Rhizopus│delemar凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)延胡索酸培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 9,12,Vi　d　-培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Aspergillus│oryzae分離基物: 酒麴凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Rubulavirus│Newcastle disease virus分離基物: 雞臟器凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研、教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長條件: 37

Mesorhizobium│tianshanense分離基物: 根瘤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

Rhizobium│sp.分離基物: 多花相思斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 63生長條件: 28存儲條件: 定期移植法

Bacillus│subtilis分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)淀粉酶培養(yǎng)基: 2生長條件: 50℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

白色鏈孢囊菌種屬: Streptosporangium│album分離基物: Acidic volcanic ash凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株；產(chǎn)生 sporaviridin-like antibiotic培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Cunninghamella│elegans凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費(fèi)用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。