化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
天青A-伊紅染色液 | 2×50ml | FS-R7085 |
產(chǎn)品分類：核酸染色
儲存條件：室溫,避光,6個月
用途：漿細胞核深藍色，胞質(zhì)灰藍色。
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
熱葡糖苷地芽孢桿菌胱抑C/半胱蛋白抑制劑C抗體Human VASP(Vasodilator-stimulated phosphoprotein) ELISA Kit人抗中性粒核周抗體(pANCA)免疫試劑盒
釀酒酵母C-藻藍/藻藍蛋白/藻青蛋白抗體Human TRIM3(Tripartite motif-containing protein 3) ELISA Kit人抗中性粒胞漿抗體(cANCA)IgM 免疫試劑盒
印度芽孢桿菌色P450 1A1抗體Human (DNA topoisomerase 1) ELISA Kit人抗中性粒/中心體抗體(ACA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌絲/蘇蛋白質(zhì)激II α抗體Human PTPRF(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase F) ELISA Kit人抗增殖核抗原(PCNA)抗體免疫試劑盒
棘孢木霉2號染色體開放閱讀框66抗體Human AFM(Afamin) ELISA Kit人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)免疫試劑盒
外皮毛霉CULLIN抗體Human ASS1(Argininosuccinate synthase) ELISA Kit人抗抑制B抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母小牛胸腺DNA抗體Human RHOA(Transforming protein RhoA) ELISA Kit人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)免疫試劑盒
阿爾通山堿線菌1號染色體開放閱讀框226抗體Human ADC(Arginine decarboxylase) ELISA Kit人抗異亮酰tRNA連接,質(zhì)(IARS)抗體免疫試劑盒
發(fā)根土壤桿菌組織蛋白L抗體Human NRTN(Neurturin) ELISA Kit人抗異亮tRNA連接,線粒體(IARS2)抗體免疫試劑盒
芽孢桿菌屬絲/蘇蛋白激II β抗體(casein kinase IIβ)Human AXIN2(Axin-2) ELISA Kit人抗胰島受體抗體(AIRA)免疫試劑盒
矩圓黑盤孢角蛋白18抗體Human VASP(Vasodilator-stimulated phosphoprotein) ELISA Kit人抗(AT)免疫試劑盒
假單胞菌轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白抗體Human PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) ELISA Kit人抗眼肌抗體(EMAb)免疫試劑盒
海水鹽單胞菌22號染色體開放閱讀框45抗體Human TRIM3(Tripartite motif-containing protein 3) ELISA Kit人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)免疫試劑盒
膜醭畢赤酵母22號染色體開放閱讀框32抗體Human (DNA topoisomerase 1) ELISA Kit人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)免疫試劑盒
卷枝毛霉CD5L抗體Human PTPRF(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase F) ELISA Kit人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)免疫試劑盒
釀酒酵母CD6抗體Human AFM(Afamin) ELISA Kit人抗血小板抗體(anti-PA Ab)免疫試劑盒(半定量)
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格：離子對色譜用試劑Ⅱ型前膠原羧基端肽試劑盒D-阿伯糖
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：離子對色譜用試劑Ⅱ型前膠原N端前肽試劑盒艾黃
小菌核屬菌種Sclerotium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：離子對色譜用試劑Ⅱ型膠原螺旋肽試劑盒阿魏鈉
天青A-伊紅染色液E1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit 人泛su激活mei規(guī)格： 48T
PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白mei規(guī)格： 48T
HK(Human Hexokinase) ELISA Kit 人己糖激mei規(guī)格： 48T
PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人丙tongsuan脫氫meiE1規(guī)格： 48T
GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成mei激mei規(guī)格： 48T
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
化工儀器網(wǎng)