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Glyceel封片劑

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更新時(shí)間:2022-07-28 15:59:52瀏覽次數(shù):257

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10ml
貨號(hào) FS-R7260 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R7260
Glyceel封片劑公司正在銷售的產(chǎn)品:大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒Anti-NKTR Antibody小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒Anti-NID1 Antibody人白介素27
大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒Anti-NKX2-1 Antibody大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體
大鼠促血管生成素2(ANG2)試劑盒Anti-NIFK Ant

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:免疫組化

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

用途:屬于水溶性封固劑,用于不需要充分脫水或脫水后會(huì)引起收縮變形(如真菌類、藻類等)的材料,尤其適用于線蟲、真菌、昆蟲的封固

注意事項(xiàng):其特點(diǎn)是將固定和封固合并成一個(gè)過程,即同時(shí)有固定和封片的功能。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

Glyceel封片劑

10ml

FS-R7260

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

芽胞桿菌高爾基體外周膜蛋白p65抗體Human TDRD5 ELISA Kit大鼠抗凝血受體(ATR)免疫試劑盒

阿氏葡萄球菌核因子GCNF/維甲受體相關(guān)受體抗體Human TDP1(Tyrosyl-DNA phosphodiesterase 1) ELISA Kit大鼠抗凝血III(AT III)免疫試劑盒

釀酒酵母G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體Human TEAD1 ELISA Kit大鼠抗凝血Ⅲ抗體免疫試劑盒

少孢根霉脊髓性肌癥蛋白SMA抗體Human TDRKH specific ELISA Kit大鼠抗內(nèi)皮抗體(AECA)免疫試劑盒

德式乳桿菌乳亞種脊髓性肌癥蛋白SMA抗體Human ALDH5A1(Succinate-semialdehyde dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit大鼠抗鏈球菌溶血O抗體(IgG)免疫試劑盒

多源中間根瘤菌脊髓性肌癥蛋白SMA抗體Human TEAD2(TEA domain family member 2) ELISA Kit大鼠抗尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒

釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體Human TEAD3 ELISA Kit大鼠抗性磷5b(TRACP-5b)免疫試劑盒

無花果曲霉轉(zhuǎn)錄因子Gli3抗體Human TCTN1 ELISA Kit大鼠抗抗體(AsAb)免疫試劑盒

生癌腸桿菌GLIS2蛋白抗體Human TEAD4 ELISA Kit大鼠抗甲狀腺(T4)抗體(IgG)免疫試劑盒

表皮葡萄球菌鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體Human ALDH16A1(Aldehyde dehydrogenase family 16 member A1) ELISA Kit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)免疫試劑盒

卷枝毛霉GSK3B相互作用蛋白抗體Human TEKT4 ELISA Kit大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒

類諾氏菌屬高爾基體膜相關(guān)蛋白6抗體Human TCTN2 ELISA Kit大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)高爾基體自身蛋白GM130抗體Human TDG ELISA Kit大鼠抗環(huán)胍肽抗體(Anti-CCP-antibody)免疫試劑盒

寄生曲霉糖代謝相關(guān)蛋白1抗體Human TCTN3 ELISA Kit大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒

球孢白僵菌G蛋白偶聯(lián)受體64抗體Human TDP1(Tyrosyl-DNA phosphodiesterase 1) ELISA Kit大鼠抗弓形蟲IgM抗體免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌γ基丁受體相關(guān)蛋白樣1抗體Human TDRD3 ELISA Kit大鼠抗弓形蟲IgG抗體免疫試劑盒

表皮葡萄球菌Staphylococcus│epidermidis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)酰芍藥苷

鐮刀菌Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品蒼術(shù)

米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品牛蒡苷元
Glyceel封片劑SOD ELISA Kit  大鼠超氧化物歧化mei規(guī)格: 48T

HSP gp96 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白糖蛋白96規(guī)格: 48T

CH50 ELISA Kit  大鼠血清總補(bǔ)體規(guī)格: 48T

B7-2/sCD86 ELISA Kit  大鼠可溶性CD86規(guī)格: 48T

HIF-1 Alpha ELISA Kit  大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α規(guī)格: 48T


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