詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 氫離子轉(zhuǎn)運ATP合成酶6G抗體 |
英文名稱 | ATP6V1G2 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
嗪草(>95%,植物激素級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,植物激素級純度:≥98%
4基傘形酰alphaD吡喃糖苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分子生物學(xué)級純度:≥98%
粘(>98%,BC) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC純度:≥98%
ASMX(>98%,BC) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC純度:≥98%
草鉀一水(>98%,BC) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BC純度:≥98%
酒石鈉一水(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
鈉十水(>99%,BC) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BC純度:≥98%
司班40 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥95%
鹽酪 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,BR純度:≥98%
糠(>97%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,BR純度:≥98%
2基咪唑(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
6嘌呤(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
Big CHAP(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
C12E8 10%溶液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥98%
氟化鈣(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
硬脂鈣 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:≥98%
AQP0/MIP26 水通道蛋白0一抗 * 0.1ml ()Hyoscyamine
TYK2 非受體酪氨蛋白激酶2一抗 * 0.1ml Dextran D70
HRH1 組受體H1一抗 * 0.1ml Dextran D40
HRH2 組受體H2一抗 * 0.1ml Dextran D20
phosphoHRH1(Ser398) 化組受體H1一抗 * 0.1ml Saxagliptin HCL
HOXA11 同源盒蛋白HOXA11一抗 * 0.1ml EGCG, ()Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract
HOXA9 同源盒蛋白HOXA9一抗 * 0.1ml Dasatinib Mohydrate
HOXB5 同源盒蛋白HOXB5一抗 * 0.1ml Exemestane (USP)
氫離子轉(zhuǎn)運ATP合成酶6G抗體Human high mobility group protein 17,HMG-17 檢測試劑盒 高速泳動蛋白17* 規(guī)格: 48T/96T
human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 檢測試劑盒 年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2* 規(guī)格: 48T/96T
Human Haptoglobin,Hpt/HP 檢測試劑盒 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Human growth-associated protein 43,GAP-43 檢測試劑盒 生長相關(guān)蛋白43* 規(guī)格: 48T/96T
Human granulysin,GNLY 檢測試劑盒 顆粒溶素* 規(guī)格: 48T/96T
Human golgi protein 73,GP-73 檢測試劑盒 高爾基蛋白73* 規(guī)格: 48T/96T
Human glycosylated serum protein,GSP 檢測試劑盒 糖化蛋白* 規(guī)格: 48T/96T