詳細介紹
產品分類:培養(yǎng)基
儲存條件:4℃,6個月
用途:植物組織培養(yǎng)常用基本培養(yǎng)基
注意事項:主要由硝酸鉀、硝酸鈣、硫suan鎂、磷酸鹽等組成,硝酸鉀工作濃度為1000mg/L、硝酸an工作濃度為1000mg/L。該試劑特點是硝酸鹽含量較高,經高壓滅菌,為無菌溶液。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Miller培養(yǎng)基 | 500ml
| FS-R6501 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
17b-hydroxyandrost-4-ene-3-... OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg
17α-Methyltestosterone(標準品) Oxiconazole Nitrate周期依賴性激5調節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g
1,3-(標準品) Oxytetracycline HCl22號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg
1,6-二氫-2-基-6-氧代-(3,4’-二吡啶)... Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g
2,3,4-三氧基(標準品) Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗體包裝250mg
2,3,4-三氧基(標準品) Paclitaxel卷曲螺旋結構域蛋白135抗體包裝100g
2,3,4-三氧基(標準品) Paclitaxel跨膜結構域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g
2,3-丁二(標準品,≥99.0%(GC)) Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g
2,3-二氫-6-基咪唑【2,1-b】噻唑鹽鹽(鹽... Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結構域蛋白124抗體包裝5g
2,6-二(標準品) Paromomycin SulfateCDK5激活結合蛋白1抗體包裝100g
2,6-二基(標準品) Pazufloxacin Mesilate磷化表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體包裝25g
2-(4-異丁?;藴势罚?Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g
2-基-4-(標準品) Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
2-乙酰(標準品) Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g
2-單硝異山梨酯(標準品) Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg
紅曲霉(斜面)Monascus anka 質量規(guī)格:>95%血小板相關免疫球蛋白試劑盒亞麻木;Secoisolaricir
白鮑魚菇Pleurotus│sp. 質量規(guī)格:≥595 µg/mg,BR血小板相關抗體IgM試劑盒氧化;Ammothamnine
亮葉耳環(huán)根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規(guī)格:含量測定血小板生成自身抗體試劑盒野;Scularin
Miller培養(yǎng)基M-CSF/FITC 熒光標記巨噬克隆激因子IgG纖維 18-22mPa.s, 5%苯/異80:20
M-CSF Receptor/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠巨噬集落激因子受體IgG纖維 45-55mPa.s, 5%苯/異80:20
Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠肥大蛋白7IgG纖維 90-1mPa.s,5%苯/異80:20
TPSB2/Tryptase Beta2/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠肥大類胰蛋白β2IgG纖維 180-220mPa.s, 5%苯/異80:20
MCT1/FITC 熒光標記單羧轉運蛋白-1IgG纖維 270-330mPa.s,5%苯/異80:20
MDM2/FITC 熒光標記雙微體2癌因IgGD(+)-乳糖,一水 98%
Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC 熒光標記化雙微體2癌因IgGD(+)-乳糖,一水 藥用級
Mdr-1/FITC 熒光標記多藥耐藥蛋白IgGD(+)-乳糖一水合物 Ultra Pure,≥99.5% (HPLC)