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Miller培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2022-07-04 14:29:48瀏覽次數(shù):244

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號(hào) FS-R6501 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6501
Miller培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品:兔心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)試劑盒 Anti-ERBB2 AntibodyG蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB11a抗體
兔胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒Anti-ERBB3 AntibodyG蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB6A抗體
兔大腸癌專一抗原3(CCSA-3)試劑盒 Anti-ERBB4 AntibodyRAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB17抗體
兔協(xié)同激

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件:4℃,6個(gè)月

用途:植物組織培養(yǎng)常用基本培養(yǎng)基

注意事項(xiàng):主要由硝酸鉀、硝酸鈣、硫suan鎂、磷酸鹽等組成,硝酸鉀工作濃度為1000mg/L、硝酸an工作濃度為1000mg/L。該試劑特點(diǎn)是硝酸鹽含量較高,經(jīng)高壓滅菌,為無菌溶液。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

Miller培養(yǎng)基

500ml

 

FS-R6501

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

17b-hydroxyandrost-4-ene-3-... OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg

17α-Methyltestosterone(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxiconazole Nitrate周期依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g

1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxytetracycline HCl22號(hào)染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg

1,6-二氫-2-基-6-氧代-(3,4’-二吡啶)... Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g

2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗體包裝250mg

2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品) Paclitaxel卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體包裝100g

2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品) Paclitaxel跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g

2,3-丁二(標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)) Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g

2,3-二氫-6-基咪唑【2,1-b】噻唑鹽鹽(鹽... Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體包裝5g

2,6-二(標(biāo)準(zhǔn)品) Paromomycin SulfateCDK5激活結(jié)合蛋白1抗體包裝100g

2,6-二基(標(biāo)準(zhǔn)品) Pazufloxacin Mesilate磷化表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

2-(4-異丁?;?biāo)準(zhǔn)品) Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g

2-基-4-(標(biāo)準(zhǔn)品) Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g

2-乙酰(標(biāo)準(zhǔn)品) Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g

2-單硝異山梨酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg

紅曲霉(斜面)Monascus anka 質(zhì)量規(guī)格:>95%血小板相關(guān)免疫球蛋白試劑盒亞麻木;Secoisolaricir

白鮑魚菇Pleurotus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥595 µg/mg,BR血小板相關(guān)抗體IgM試劑盒氧化;Ammothamnine

亮葉耳環(huán)根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定血小板生成自身抗體試劑盒野;Scularin
Miller培養(yǎng)基M-CSF/FITC  熒光標(biāo)記巨噬克隆激因子IgG纖維 18-22mPa.s, 5%苯/異80:20

M-CSF Receptor/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠巨噬集落激因子受體IgG纖維 45-55mPa.s, 5%苯/異80:20

Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大蛋白7IgG纖維 90-1mPa.s,5%苯/異80:20

TPSB2/Tryptase Beta2/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大類胰蛋白β2IgG纖維 180-220mPa.s, 5%苯/異80:20

MCT1/FITC  熒光標(biāo)記單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1IgG纖維 270-330mPa.s,5%苯/異80:20

MDM2/FITC  熒光標(biāo)記雙微體2癌因IgGD(+)-乳糖,一水 98%

Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC  熒光標(biāo)記化雙微體2癌因IgGD(+)-乳糖,一水 藥用級(jí)

Mdr-1/FITC  熒光標(biāo)記多藥耐藥蛋白IgGD(+)-乳糖一水合物  Ultra Pure,≥99.5% (HPLC)


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