產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
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貨號(hào) | FS-R6374 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研 | 貨號(hào) | FS-R6374 |
兔芳香酶(ARO)試劑盒Anti-BRAF Antibody胞漿蛋白PACSIN3抗體
兔N-乙酰半乳糖-6-硫酸酯酶(GAS)試劑盒Anti-BNIP3 Antibody跨膜接頭蛋白PAG抗體
兔谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2022-07-04 11:29:27瀏覽次數(shù):227
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
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貨號(hào) | FS-R6374 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研 | 貨號(hào) | FS-R6374 |
產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)
儲(chǔ)存條件 —20℃,12個(gè)月
用途 又稱培養(yǎng)細(xì)胞消化液,用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項(xiàng) 無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、碳酸氫銨組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液 | 100ml | FS-R6374 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
促狀腺激(TSH)TSH ELISA Kit腺苷環(huán)化10抗體包裝5g
促黃體激(LH)LH ELISA Kit腺苷環(huán)化5抗體包裝25g
促紅細(xì)胞生成(EPO)EPO ELISA Kit腺苷環(huán)化6抗體包裝5g
雌三(E3)E3 ELISA Kit腺苷環(huán)化9抗體包裝5g
雌激硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)SULT1E1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號(hào)染色體)抗體包裝1g
雌激(E)E ELISA Kit三磷腺檸檬裂解抗體包裝5g
雌二受體(ER)ER ELISA Kitβ淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體包裝25g
雌二(E2)E2 ELISA Kit內(nèi)收蛋白a1抗體包裝5g
垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)PACAP ELISA Kitα2纖溶色上皮衍生因子抗體包裝100ml
垂草扁桃(VMA)VMA ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝25ml
穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)PF/PFP ELISA Kit早老γ分泌抗體包裝5ml
程序性死亡1(PD-1)PD-1 ELISA Kit鈉ATP蛋白a1抗體包裝100ml
成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)FGF9 ELISA KitRho鳥苷交換因子2抗體包裝25ml
成纖維細(xì)胞生長因子8(FGF8)FGF8 ELISA Kit磷化Rho鳥苷交換因子2抗體包裝1g
成纖維細(xì)胞生長因子6(FGF6)FGF6 ELISA Kit去整合樣金屬蛋白9抗體包裝25g
載脂蛋白E抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Clemizole is a H1 histamine receptor antagonist.Recently, researchers have ident
胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液DBC1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠膀胱癌缺失因1IgG正戊烷 AR,99%
DAPK1/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激1IgG正戊烷 農(nóng)殘級(jí)
DAPK2/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激2IgG正戊烷 for HPLC, ≥99.0%
DAPK3/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激3IgG正戊烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
DARPP32/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠多巴、cAMP調(diào)節(jié)蛋白IgG間苯二 AR
Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化多巴、cAMP調(diào)節(jié)蛋白IgG木質(zhì)磺鈉 96%
Phospho-DARPP32 (Thr75) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化多巴、cAMP調(diào)節(jié)蛋白IgG1-十四烯 95%
phospho-Cyclin E(Thr395) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化周期EIgG1-十四烯 ,>99.5%(GC)