詳細介紹
商品介紹:
測定意義 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。 測定原理 硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+,F(xiàn)e2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。 自備實驗用品及儀器 天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀、氮吹儀。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321309 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
平滑假絲酵母精加壓受體2抗體Human KLF17 ELISA Kit小鼠腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒
香蕉骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體Human KIF1C ELISA Kit小鼠腎前體免疫試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝)膜粘連蛋白8抗體Human KIF22 ELISA Kit小鼠腎(Renin)免疫試劑盒
泰塔溫沙壤土桿菌水通道蛋白8抗體Human KIF20A ELISA Kit小鼠腎上腺髓質(ADM)免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌錨蛋白重復結構域蛋白40抗體Human KIF1B ELISA Kit小鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒
肉梭菌 C型凋亡抑制因子5抗體Human KIF26B ELISA Kit小鼠腎上腺(EPI)免疫試劑盒
炭黑曲霉水通道蛋白-3抗體Human KIF2A ELISA Kit小鼠神經營養(yǎng)因子4(NT-4)免疫試劑盒
芽胞桿菌載脂蛋白D抗體Human KIF1B ELISA Kit小鼠神經營養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒
釀酒酵母丁酰基合成3抗體Human KIF1C ELISA Kit小鼠神經型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒
黃溶鏈霉菌脂肪源性亮基肽抗體(血管內皮生長因子誘導蛋白)Human KIF19 ELISA Kit小鼠神經粘附分子1(NCAM1)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌線粒體凋亡誘導因子2抗體Human KIF20A ELISA Kit小鼠神經特異性烯化(NSE)免疫試劑盒
食砜節(jié)桿菌ABL2蛋白抗體Human KIF26B ELISA Kit小鼠神經肽Y(NPY)免疫試劑盒
糖多孢菌血管緊張轉換ACE1抗體Human KIF22 ELISA Kit小鼠神經絲蛋白L(NF-L)免疫試劑盒
黑根霉血管緊張轉換2抗體Human KIF2B ELISA Kit小鼠神經生長因子前體(proNGF)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌Acinus抗體Human KIF2C ELISA Kit小鼠神經生長因子(NGF)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌醋激1抗體Human KIF2A ELISA Kit小鼠神經膠質纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規(guī)格:>98%,BS白介37試劑盒新對葉百部堿
: ATCC12291資源名稱: 假腸膜明串珠菌 質量規(guī)格:>97%,BR白介35試劑盒小蕓木
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格:>98%,BR白介33試劑盒薟精
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒50管/24樣豌豆根瘤 苯氧基乙酰谷草轉氨;天門冬氨基轉移1Elisa
褐黃木耳(琥珀木耳) 丁二酸與4-羥基-2,2,6,6-四甲基-1-的聚合物谷草轉氨;天門冬氨基轉移2Elisa
芥黃蜜環(huán) 5-溴-2-甲氧基血小板內皮粘附分子1Elisa
BL21(DE3)star Boc-D-脯酰腫瘤壞死因子受體超家族成員4Elisa
滑假絲酵母 3-氟苯磺酰腺核苷酸Elisa
中慢生華癸根瘤 2,7-二芴逆轉錄病Elisa
釀酒酵母 1-溴-2-異氧基苯烏頭酸2Elisa
鼠李糖乳桿 西咪替丁鹽酸鹽I型膠原羥基端肽β降解產物Elisa
枯草芽胞桿 2-羥基-6-甲氧基苯甲烏頭酸1Elisa
釀酒酵母 3,4,5-三氟苯甲酮烏頭酸2Elisa
大豆根瘤 3-(2-吡咯基)酸甲酯粘蛋白4Elisa
草莖點霉 N-甲基-N-(4-)粘蛋白;粘液5BElisa
球孢白僵 3-溴-2-甲基三氟甲苯c-fosElisa
土壤玫瑰單胞 N-環(huán)己基脲糖皮質受體βElisa
玉米大斑凸臍蠕孢 3,4-二氟芐核轉錄因子p50Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。