公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測定意義: 血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。 測定原理: Fe2+與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe3+結(jié)合,剩余未結(jié)合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時吸光度A1與未結(jié)合Fe3+數(shù)量正相關(guān);酸化后,轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe3+釋放,并且進一步被還原成Fe2+ ,此時吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關(guān)。A2減A1與TIBC濃度呈正比。 自備實驗用品及儀器: 天平、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
自然銅(醋煅)(標準品)英文名: Apraclonidine hydrochloride神經(jīng)組織特異性F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體包裝5g
棕櫚(標準品)英文名: Tazarotene胞內(nèi)活化的Notch1蛋白抗體包裝100g
棕矢車菊(標準品)英文名: Tazarotene神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體包裝25g
走馬胎(標準品)英文名: Ganoderic acid D神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體包裝5g
祖師麻(唐古特瑞香)(標準品)英文名: Levoceitrizine HCl膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體包裝1g
鉆山風(標準品)英文名: Levoceitrizine HCl霉敏感性肽蛋白抗體包裝5g
醉椒英文名: Cetirizine HydrochlorideN-乙基順二酰亞敏感融合蛋白抗體包裝100mg
醉魚草皂苷IVb(標準品)英文名: Ramosetron hydrochlorideNIPAL2蛋白抗體包裝10mg
左旋多巴(標準品)英文名: Etodolac神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體包裝25mg
左旋樟腦(標準品)英文名: Amfebutamone Hydrochloride軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體包裝25g
端羥基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名: rosiglitazone hydrochloride谷受體3A抗體包裝5g
端羥基聚乳乙共聚物50/50(重均分子量0.5-...英文名: BENZBROMARONE谷受體3B抗體包裝1g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬)英文名: Butenafine HCl谷受體3A+3B抗體包裝5g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)英文名: Tropisetron hydrochlorideP53誘導凋亡抑制蛋白α抗體包裝1g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量109-150萬)英文名: Tropisetron hydrochloride胞質(zhì)5'核苷1A抗體包裝250mg
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品激肽釋放2試劑盒7-表紫杉;7-Epitaxol
JCM1034=KCTC3151資源名稱: 嗜乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR激肽釋放11試劑盒補骨脂二氫黃 ;Bavachini
文斯頓島希瓦氏菌Shewanella│livingstonensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR激肽釋放10試劑盒表白樺脂;Epibetulinic a
血清總鐵結(jié)合能力測試盒100管/96樣鱈鹽球 二苯基硅烷5α還原Elisa
土壤薄層 四溴雙S腎炎因子Elisa
茄鐮孢 DL-間酪頂體Elisa
蠟狀芽孢桿蕈狀變種 對溴芐DNA甲基化轉(zhuǎn)移Elisa
花臉香蘑 聚乙二二縮水甘油溶血Elisa
綠木霉 3-溴-4-甲氧基20-羥化二十碳四烯酸Elisa
寬鱗大孔 3,4-二羥基S轉(zhuǎn)移Mu5Elisa
硫黃色節(jié)桿 丁香酸乙酯過氧化1Elisa
釀酒酵母 2,4-二氟肉桂酸過氧化4Elisa
鉤狀木霉 5--2-氟過氧化5Elisa
食砜節(jié)桿 三溴化吡啶維生D結(jié)合蛋白Elisa
多孔木霉 2-溴-4-硝苯抗透明帶結(jié)合蛋白3抗體Elisa
側(cè)孢短小芽胞桿 2,4-二氟苯血清白蛋白Elisa
乳酸乳球乳亞種 1-芐基-3-甲氧羰基-4-酮鹽酸鹽環(huán)氧合2Elisa
香鬼筆 3-溴-4-L-精Elisa
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。