公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。 測(cè)定原理 漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、震蕩儀。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線(xiàn)0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
黑色淺灰鏈霉菌血管生成樣蛋白4抗體Human KCNIP1 ELISA Kit小鼠葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒
弗吉尼亞鏈霉菌整合樣金屬蛋白與凝血10型抗體Human KCTD14 ELISA Kit小鼠破傷風(fēng)(Tetanus)抗體免疫試劑盒
鐮刀菌嘧啶核內(nèi)切2抗體Human KCNIP3 ELISA Kit小鼠破骨分化因子(ODF)免疫試劑盒
根瘤菌神經(jīng)絲蛋白抗體Human KCNJ5 ELISA Kit小鼠蘋(píng)果脫氫(MDH)免疫試劑盒
污黑腐皮殼β淀粉樣肽(1-28)抗體Human KCNAB1 ELISA Kit小鼠核苷磷化(PNP)免疫試劑盒
銹色桿孢囊菌有絲分裂激B抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒
灰葡萄孢(灰霉病菌)軟骨蛋白聚糖抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
毛榛畢赤酵母去整合樣金屬蛋白10抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠牛小腸堿性磷(CIAP)免疫試劑盒
釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族9抗體Human KCNE1 ELISA Kit小鼠XIII B(F13B)免疫試劑盒
蠟?zāi)俸^蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體Human KCNE4 ELISA Kit小鼠XIII A1(F13A1)免疫試劑盒
釀酒酵母植物生長(zhǎng)激ABP1抗體Human KARS ELISA Kit小鼠VIIIa輕鏈(F8aLC)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體Human KCNF1 ELISA Kit小鼠Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒
金針菇(毛柄金錢(qián)菌、冬菇)α紅分化相關(guān)因子抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠Ⅺ(FⅪ)免疫試劑盒
葡萄鏈格孢*血管緊張激活蛋白1抗體Human KCNG4 ELISA Kit小鼠Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒
焦曲霉Alpha清蛋白抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠Ⅸ(FⅨ)免疫試劑盒
粘質(zhì)沙雷氏菌AFAP1L2抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠Ⅷ(FⅧ)免疫試劑盒
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)白介28A試劑盒環(huán)戊烯二
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)白介26試劑盒環(huán)戊烯二
馬杜放線(xiàn)菌Actinomadura│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)白介25試劑盒無(wú)梗五加苷B
土壤漆酶測(cè)試盒100管/48樣油菜假單胞 2-氨基-5-溴-3-硝基吡啶鈉肽受體BElisa
弗蘭克氏 2-溴-4-硝基吡啶白抗原G5Elisa
腐皮殼 苯硅烷Smad同源物3Elisa
短短芽胞桿 1,3-二甲基吡唑Smad同源物4Elisa
洋蔥青霉 1,5-二甲基-1H-吡唑Smad同源物6Elisa
新疆鹽紅 2-溴-5-氟甲酯Smad同源物7Elisa
耐林丹黃桿 2-溴-5-氨基甲酯能受體P2X7Elisa
熒光假單胞 4-溴鄰苯二甲酰亞酪激受體Elisa
腐皮鐮孢 4--2,6-二氟苯P物質(zhì)受體Elisa
枯草芽孢桿 3-溴苯酞抗SSA IgG抗體Elisa
東方伊薩酵母 4-溴-1,3-苯二甲酸抗SSB IgG抗體Elisa
萊比托游動(dòng)球 N-叔丁基甘 鹽酸鹽谷氨酰?;h(huán)化Elisa
熱帶假絲酵母 5-甲氧基-2-巰基-4-嘧啶肌酸激同工MBElisa
中山乳芽胞桿中山亞種 己酸芐酯肽基脯氨酰順?lè)词疆悩?gòu)NIMA相互作用蛋白1Elisa
猴頭 1-溴-2,4-二甲基-5-(易)腫瘤壞死因子受體超家族成員11AElisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。