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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
芽孢晶體染色液 | 50ml | FS-R7079 |
產(chǎn)品分類：微生物染色
儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月
用途：芽孢晶體會(huì)被染成紅色，菌體呈紅色，可以判斷某些芽孢桿菌產(chǎn)生堿溶性蛋白晶體(伴孢晶體)。但應(yīng)注意，觀察芽孢應(yīng)在成熟期，但也不能過久，否則只能看到芽孢，而營養(yǎng)體已經(jīng)消失
注意事項(xiàng)：主要由石炭酸、乙醇、品紅等組成
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
納西桿菌表面趨化因子受體3抗體Human C1QTNF2(C1q and Tumor Necrosis Factor Related Protein 2) ELISA Kit人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)免疫試劑盒
赤褐鵝膏菌補(bǔ)體C2抗體Human C1QTNF9(C1q and Tumor Necrosis Factor Related Protein 9) ELISA Kit人粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌造血干抗原CD133抗體Human C3b(Complement Fragment 3b) ELISA Kit人粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)免疫試劑盒
玫瑰色考克氏菌內(nèi)受體抗體Human BIRC7(Baculoviral IAP repeat-containing protein 7) ELISA Kit人粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒
平菇(黑平1號)CD20抗體Human C3a(Complement Component 3a) ELISA Kit人粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒
褐囊蜜環(huán)菌CD24抗體Human Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA Kit人粒集落激因子(CSF3)抗體免疫試劑盒
乙酰微小桿菌白介2受體a鏈/IL-2RA抗體Human BAK1(Bcl2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit人什曼原蟲(Leishmania)抗體(IgG)免疫試劑盒
土庫曼鹽土生古菌B和T淋巴衰減蛋白抗體Human Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA Kit人尿肽(KP)免疫試劑盒
皺孢鏈霉菌CD4抗體Human BACE1(Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit人李斯特菌抗體(IgM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種CD44抗體Human BANP(BTG3 Associated Nuclear Protein) ELISA Kit人李斯特菌抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母白共同抗原抗體Human BAG3(Bcl2 Associated Athanogene 3) ELISA Kit人冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)免疫試劑盒
發(fā)酵乳桿菌CD5抗體Human BALP(Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit人冷球蛋白(CG)免疫試劑盒
德沃斯氏菌間粘附分子-1抗體Human BCAN(Brevican) ELISA Kit人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌神經(jīng)粘附分子1抗體Human BCL2L1/BCL-X(Bcl-2 Like Protein 1/Bcl2 Associated X Protein) ELISA Kit人類似cDNA順序BC027382 免疫試劑盒
產(chǎn)色鏈霉菌L選擇抗體Human BCAR1(Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1) ELISA Kit人類免疫缺陷?。℉IV）1+2 抗體 免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌CD68抗體Human C1QTNF9(C1q and Tumor Necrosis Factor Related Protein 9) ELISA Kit人類肌腱蛋白c(TNC)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%5核苷試劑盒
發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus│fermantum 質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基試劑盒α-菠甾-3-O-β-D-葡萄糖苷
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%Ⅳ型前膠原基末端肽試劑盒
芽孢晶體染色液FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二磷suan醛縮mei規(guī)格： 48T
cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人組織蛋白meiD規(guī)格： 48T
HSL(Human hormone sensitive lipase) ELISA Kit 人激su敏感性脂肪mei規(guī)格： 48T
PK(Human pancreatickininogenase) ELISA Kit 人胰激肽原mei規(guī)格： 48T
ACO-2(Human aconitase 2) ELISA Kit 人烏頭suanmei2規(guī)格： 48T
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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