PB磷酸鹽粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品：人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒Anti-MEGF9 Antibody小鼠CD19分子
人球蛋白A2 (IgA2)試劑盒Anti-MED27 Antibody人糖基化依賴的黏附分子
人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP-11)試劑盒Anti-MED26 Antibody大鼠成纖維生長因子10
人基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)試劑盒Anti-MEGF9 Antibod

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：免疫組化

儲存條件：室溫,24個月

用途：多用于免疫組化和細(xì)胞染色

注意事項：免疫組化常用的一種磷酸緩沖液,主要由磷酸氫ER鈉和磷酸ER氫鈉組成,不含氯化鈉,溶液pH約為7.2-7.4。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

Stenotrophomonas rhizophila （可定）β半乳糖苷1樣蛋白3抗體Human VTA1 ELISA Kitβ淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒

溜曲霉糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human VPS24 ELISA Kitα1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒

黑曲霉腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體Human VPS18 ELISA KitTau蛋白免疫試劑盒

燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎N*誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白1抗體Human VPS28 ELISA KitN端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒

金黃硬皮馬勃G蛋白偶聯(lián)受體18抗體Human VPS28 ELISA Kit猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

金黃亞種G蛋白偶聯(lián)受體119抗體Human VPS33A ELISA Kit猴脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種G蛋白偶聯(lián)受體88抗體Human VN1R4 ELISA Kit猴載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒

金黃亞種G蛋白偶聯(lián)受體125抗體Human VMO1 ELISA Kit猴載脂蛋白A1(Apo-A1)免疫試劑盒

盤菌狀肉座菌谷受體紅藻離子2/谷受體6抗體Human VNN2 ELISA Kit猴鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgM抗體免疫試劑盒

大腸埃希氏菌谷受體紅藻離子3/谷受體7抗體Human VPRBP ELISA Kit猴鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒

黃曲霉谷受體紅藻離子2/3抗體Human VBP1 ELISA Kit猴胰島樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒

長白山藤氏酵母離子型谷受體4抗體Human VCP(valosin-containing protein) ELISA Kit猴胰島(INS)免疫試劑盒

噴泉鏈霉菌磷化離子型谷受體4抗體Human VPREB3 ELISA Kit猴血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒

pGAPZαA代謝型谷受體1A抗體Human VDAC3 ELISA Kit猴狀腺原(T3)免疫試劑盒

無花果曲霉周期蛋白依賴性激調(diào)節(jié)亞基2抗體Human CNDP2(Cytosolic non-specific dipeptidase) ELISA Kit猴絨毛膜促性腺激(CG)免疫試劑盒

長枝木霉β腎上腺能受體激2抗體Human VDAC2 ELISA Kit猴前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9(PCSK9)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)5,7-二羥基色原

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：80%,用于顯微鏡伽升沃 D

赤桿菌Erythrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%(GC)伽升沃 C
PB磷酸鹽粉劑CaN ELISA Kit   大鼠鈣調(diào)磷suanmei規(guī)格： 48T

INHBP ELISA Kit  大鼠抑制su結(jié)合蛋白規(guī)格： 48T

TPO-Ab ELISA Kit  大鼠抗jia狀腺過氧化物mei規(guī)格： 48T

AIF ELISA Kit  大鼠凋亡誘導(dǎo)因子規(guī)格： 48T

dsDNA ELISA Kit   大鼠抗雙鏈DNA/天然DNA規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。