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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>細(xì)胞檢測(cè)>>M緩沖液

M緩沖液

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更新時(shí)間:2022-07-06 09:35:26瀏覽次數(shù):285

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號(hào) FS-R6638 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6638
M緩沖液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:豚鼠雌誘導(dǎo)蛋白PS2 (EIPS2)試劑盒Anti-LAMA1 Antibody泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗體
豚鼠脂肪酸合酶(FASN)試劑盒Anti-LAMC1 Antibody葡萄膜自身抗原Uaca抗體
豚鼠Ⅲ型前膠原羧基端原肽(PⅢCP)試劑盒Anti-LAMA2 Antibody尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶2B4抗體
豚鼠半胱氨酰白三烯受體2(CYSLTR

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢(xún)并訂購(gòu)!

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

M緩沖液

500ml

FS-R6638

產(chǎn)品分類(lèi):細(xì)胞其他

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月

用途:含有咪唑、氯化鎂、EGTA、巰基乙醇等組成。用于細(xì)胞微絲的顯示。

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn),搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

二氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Itaconic acid磷化粘著斑激抗體包裝1g

二氫楊梅(標(biāo)準(zhǔn)品) Jenner's stain纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體包裝250mg

二氫醉椒 KT-5823FBXO24蛋白抗體包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品) L(-)-ArabitolFBXO27蛋白抗體包裝100g

法篳枝苷 L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrateFBXO4蛋白抗體包裝25g

法林二 Lactobionic acid成纖維生長(zhǎng)因子受體3抗體包裝500g

番茄苷 L-Amino acid oxidase >4 U/mgFAM71D蛋白抗體包裝1g

番茄紅(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Amino acid oxidase >4 U/mgF-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體包裝25g

番茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Lanthanum (III) acetate, pentahydrateFBXL16蛋白抗體包裝5g

番石榴苷(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Canavanine sulfate saltFBXL20蛋白抗體包裝10g

番石榴葉(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Carnitine hydrochlorideFBXL15蛋白抗體包裝250g

番瀉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Carnitine L-tartrateFBXL21蛋白抗體包裝50g

番瀉苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Lead (II) iodideF-box蛋白家族FBXO7抗體包裝100g

番瀉苷C(標(biāo)準(zhǔn)品) Lead (II) stearateF-box蛋白家族FBXO11抗體包裝25g

番瀉苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) Lead (II) sulfateF-box蛋白家族FBXO25抗體包裝1g

鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR傷寒試劑盒芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;A

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品山梨脫氫試劑盒去氫二異丁香;Dehydrodiiso

芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)沙眼衣原體抗原試劑盒5-羥基糠;5-Hydroxymet
M緩沖液GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha)  葡萄糖合成激mei-3α抗原(多肽抗原)規(guī)格: 0.5mg

phospho-GSK-3 Beta(pSer9)  磷suan化葡萄糖合成激mei-3β抗原規(guī)格: 0.5mg

phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216)  磷suan化葡萄糖合成激mei3α/β抗原規(guī)格: 0.5mg

GSR/GRase(glutathione reductase)  還原mei抗原規(guī)格: 0.5mg

A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human)  A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽規(guī)格: 0.5mg

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應(yīng)曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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