網(wǎng)織紅細(xì)胞染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠纖維蛋白原(FBG)試劑盒Anti-MICB Antibody信號(hào)通路WNT10B抗體
豚鼠硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)試劑盒Anti-MIF AntibodyEBV核蛋白2抗體
豚鼠鈣聯(lián)蛋白(CNX)試劑盒 Anti-MIF Antibody(0314)Wnt信號(hào)受體蛋白抗體
豚鼠多巴(DA)試劑盒 Anti-MIF Antibody富含脯同源蛋白1

產(chǎn)品分類：細(xì)胞染色

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：用于網(wǎng)織紅細(xì)胞活體染色

注意事項(xiàng)：背景清楚,顏色鮮亮

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

龍膽；2,5-二羥基(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoalG蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝50mg

龍脷葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Activated charcoalG基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體包裝25g

龍腦（標(biāo)準(zhǔn)品） Activated charcoalG蛋白α抗體包裝5g

植提標(biāo)準(zhǔn)品 Activated charcoalG蛋白β樣蛋白抗體包裝100g

（標(biāo)準(zhǔn)品）  通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體包裝25g

龍血A（標(biāo)準(zhǔn)品） Molecular sieves Type 13X磷化gp130抗體包裝5g

龍芽楤木（標(biāo)準(zhǔn)品） Molecular sieves Type 13X糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體包裝1g

龍眼肉（標(biāo)準(zhǔn)品） Molecular sieves Type 13X高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體包裝5g

漏蘆(祁州漏蘆)（標(biāo)準(zhǔn)品） Molecular sieves Type 13X胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體包裝5g

蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Molecular sieves Type 13X糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體包裝100mg

蘆根（標(biāo)準(zhǔn)品） Molecular sieves Type 13X促代謝型谷受體2抗體包裝500mg

蘆薈(好望角蘆薈)（標(biāo)準(zhǔn)品） Molecular sieves, 3 ?G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝1g

蘆薈大黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Molecular sieves, 3 ?β1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移6抗體包裝500mg

蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Molecular sieves, 3 ??；?β-基乙磺抗體包裝1g

蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Molecular sieves, 3 ?赤霉抗體包裝1g

異常畢赤酵母Pichia anomala 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR前列腺H2試劑盒棉籽糖;Raffinose

平菇(漢玉平)Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定前列腺F2α試劑盒馬來;Maleic acid

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,EP6.5 前列腺F試劑盒麥冬皂苷B;Ophiopogonin B
網(wǎng)織紅細(xì)胞染色液MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)  多藥耐藥相關(guān)蛋白2規(guī)格： 0.5mg

MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5)  多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原規(guī)格： 0.5mg

MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28)  線粒體核糖體蛋白L28(抗原)規(guī)格： 0.5mg

MLH1(Mutl homolog l gene)  錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原規(guī)格： 0.5mg

MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1)  胃粘液su抗原規(guī)格： 0.5mg