檸檬酸鈉抗原修復(fù)液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒Anti-NTS Antibody小鼠血小板因子3
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)試劑盒Anti-NUB1 Antibody大鼠胰島素自身抗體
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒Anti-NUMA1 Antibody人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶24(MMP-24)試劑盒Anti-NUP35 An

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：免疫組化

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后的抗原修復(fù)。

注意事項(xiàng)：常用的抗原修復(fù)液,主要由檸檬酸鈉組成,調(diào)PH值6.0。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

污膠鼓菌人乙型肝炎表面抗原單克抗體（檢測(cè)）Human STOML1 ELISA Kit大鼠骨織(Ostn)免疫試劑盒

白色沉積物桿菌人乙型肝炎e抗原單克（包被）抗體Human STK4 ELISA Kit大鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒

根瘤菌人乙型肝炎e抗原單克（檢測(cè)）抗體Human STOM(Stomatin) ELISA Kit大鼠骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白免疫試劑盒

拜氏醋桿狀菌小鼠抗人血紅蛋白單克抗體Human STK16 ELISA Kit大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒

貝倫格葡萄座腔菌梨生專(zhuān)化型甲型流感病血凝抗體Human STXBP3 ELISA Kit大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)免疫試劑盒

淡紫青霉磷化HER2受體抗體Human SULT1C2 ELISA Kit大鼠骨特性堿性磷C端肽免疫試劑盒

谷棒桿菌Ⅰ型組蛋白去乙?；?抗體Human SULT2B1 ELISA Kit大鼠骨橋(OPN)免疫試劑盒

假單胞菌屬磷化HER2受體抗體Human SULT2A1 ELISA Kit大鼠骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒

莖點(diǎn)霉屬磷化組蛋白去乙?；?/span>8抗體Human SULT4A1 ELISA Kit大鼠骨鈣(OT)免疫試劑盒

黃柄雞油菌HLA-DR抗體Human SUMF2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌人類(lèi)白抗原G抗體Human SUMF1 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌高遷移率族蛋白A2抗體Human TBXAS1(Thromboxane-A synthase) ELISA Kit大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒

丁香直絲鏈霉菌高遷移率族蛋白B1抗體Human SUCLA2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒

交鏈孢菌血紅氧合2抗體Human SUCLG2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)免疫試劑盒

白金針21HOXc8抗體Human SUCLG1 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒

漏斗狀側(cè)耳（鳳尾菇）原癌基因H-ras抗體Human ARG1(Arginase-1) ELISA Kit大鼠骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒

核桃黃極毛桿菌Xanthomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)楊梅苷

土生類(lèi)諾氏菌Nocardioides│terrigena 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.95%(GC)氧化槐果堿

大腸埃希氏菌DH5α/pcDNA-Gag-NC-C15S/C18SEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)莪術(shù)二
檸檬酸鈉抗原修復(fù)液HO-2 ELISA Kit  大鼠血紅su氧合mei2規(guī)格： 48T

Cr ELISA Kit  大鼠骨膠原交聯(lián)規(guī)格： 48T

C I CP ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規(guī)格： 48T

DPD ELISA Kit  大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉規(guī)格： 48T

PY ELISA Kit  大鼠吡啶交聯(lián)物規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。