詳細(xì)介紹
探針?lè)ǎ?/font>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):脂性Cy5.5-N-羥基琥珀酰亞胺酯
貨號(hào):FSP050
產(chǎn)品規(guī)格:1 mg/5 mg
分類(lèi):熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
?
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱(chēng)、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ?,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
大鼠白介素7(IL-7)分析檢測(cè)試劑盒N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb100 ul
大鼠白介素1β前體(pro-IL1B)分析檢測(cè)試劑盒LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul
大鼠α1抗胰蛋白酶前體(pre-α1-AT)分析檢測(cè)試劑盒LSm2 (D9X6C) Rabbit mAb100 ul
魚(yú)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFB1)分析檢測(cè)試劑盒iNOS (D6B6S) Rabbit mAb100 ul
魚(yú)孕激素/孕酮(PROG)分析檢測(cè)試劑盒Phospho-SQSTM1/p62 (Thr269/Ser272) Antibody100 ul
魚(yú)類(lèi)甲狀腺素(T4)分析檢測(cè)試劑盒PFKFB3 (D7H4Q) Rabbit mAb1 Kit
CHL(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)PathScan® Phospho-HER4/ErbB4 (panTyr) Sandwich Kit100 ul
AAV-293(人胚腎細(xì)胞)價(jià)格IFITM1 Antibody1 Kit
Anglne(人卵巢癌細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)PathScan® Total HIF-1α Sandwich Kit100 ul
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)Phospho-FoxO3a (Ser253) (D18H8) Rabbit mAb100 ul
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)MT1-MMP (D1E4) Rabbit mAb100 ul
LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)報(bào)價(jià)MMP-2 (D8N9Y) Rabbit mAb100 ul
NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)報(bào)價(jià)TRF2 (D1Y5D) Rabbit mAb300 ul
NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)說(shuō)明書(shū)SignalSilence® IRF-7 siRNA I100 ul
(R型)原人參三醇*LAMTOR4/C7orf59 (D4P6O) Rabbit mAb100 ul
橙皮素520-33-2 實(shí)驗(yàn)方法SOD2 (D3X8F) XP® Rabbit mAb20 ul
川芎嗪1124-11-4實(shí)驗(yàn)方法SOD2 (D3X8F) XP® Rabbit mAb100 ul
脂性Cy5.5-N-羥基琥珀酰亞胺酯金黃色葡萄球菌種屬: Staphylococcus│aureus凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的消械對(duì)微生物的殺滅效果檢定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)菌種培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Zymomonas│mobilis分離基物: 污泥凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Alcanivorax│sp.分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類(lèi)降解菌培養(yǎng)基: 333生長(zhǎng)條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
雙氮纖維單胞菌種屬: Cellulomonas biazotea分離基物: Soil from Greenville Agr. Exp. Farm凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: NB生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧,72h存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│subtilis分離基物: 納豆食品凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 納豆,產(chǎn)孢良好。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Candida│tropicalis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 利用五碳糖、亞硫酸廢液酵母培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Marinobacter│algicola分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)淀粉酶、脂肪酶菌株培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Cladosporium│herbarum凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: LB培養(yǎng)基凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 病毒生活周期及病毒基因表達(dá)調(diào)控的研究培養(yǎng)基: 304生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法