DiD三氟甲磺酸鹽實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：DiD三氟甲磺酸鹽
貨號(hào)：FSP184
產(chǎn)品規(guī)格：10 mg
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
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小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞報(bào)價(jià)Transthyretin (D8T4Q) Rabbit mAb100 ul

小鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞價(jià)格RANTES (R40) Antibody100 ul

小鼠腦成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)RANTES (P20) Antibody100 ul

A172（人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞）報(bào)價(jià)RANTES Antibody (Rodent Specific)100 ul

HSC-T6（大鼠肝星形細(xì)胞）價(jià)格ASF1A (C6E10) Rabbit mAb100 ul

LS-174T（人結(jié)腸腺癌細(xì)胞）報(bào)價(jià)Phospho-PDGF Receptor α (Tyr754) (23B2) Rabbit mAb20 ul

LTEP-a-2（人肺腺癌細(xì)胞）價(jià)格Phospho-PDGF Receptor α (Tyr754) (23B2) Rabbit mAb100 ul

SW1116（人結(jié)腸腺癌細(xì)胞）現(xiàn)貨供應(yīng)Phospho-c-Jun (Thr93) Antibody500 ul

TG-905（人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）說明書CD14 (61D3) Mouse mAb (FITC Conjugate)100 ul
DiD三氟甲磺酸鹽Pleurotus│eryngii分離基物: 腐朽木斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 17生長條件: 20℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Sporobolomyces│beijingensis分離基物: Athyrium kusnezoffii凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 17℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 肥料培養(yǎng)基: 0013生長條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

解淀粉類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│amylolyticus分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Pseudomonas│aeruginosa凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

季也蒙畢赤酵母種屬: Pichia│guilliermondii凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Rhodosporidium│sphaerocarpum分離基物: 水樣/海水斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海酵母培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法

谷氨酸棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L-色氨酸。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Sulfolobus│islandicus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 在古菌內(nèi)表達(dá)GST-PCNA3培養(yǎng)基: 453生長條件: 80℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。