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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：蛋白檢測
儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月
用途：總蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA微量分析
注意事項(xiàng)：主用用于微量蛋白質(zhì)的檢測,主要由BCA溶液BSA標(biāo)準(zhǔn)品組成,在562nm處測吸光值,檢測范圍在2.5-200ug/ml。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量BCA蛋白定量試劑盒 | 250T | FS-R7545 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
Acinetobacter soli Kim et al. 鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall1抗體Anti-GH1 Antibody腺苷A2b受體(ADORA2b)
擬枝孢鐮孢鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall4抗體Anti-GFRA1 Antibody腺苷A2a受體(ADORA2a)
魯考弗奇酵母轉(zhuǎn)錄因子SOX17抗體Anti-GH1 Antibody線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)
蜥蜴纖細(xì)芽孢桿菌溴化太林相關(guān)蛋白2抗體Anti-GH1 Antibody線粒體乙脫氫(ALDM)
濕鏈霉菌S100鈣結(jié)合蛋白A8抗體Anti-GHR Antibody線粒體外膜轉(zhuǎn)位70A(TOMM70A)
黃曲霉唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集抗體Anti-GILT/IFI30 Antibody線粒體鐵蛋白(MFRN)
冷溫木克酵母唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集1抗體Anti-GHR Antibody線粒體鐵蛋白(FTMT)
枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子SP3抗體Anti-GILT/IFI30 Antibody線粒體融合2(MFN2)
香菇轉(zhuǎn)錄因子SP6抗體Anti-GIP Antibody線粒體融合1(MFN1)
PaenibacillusSPOP蛋白抗體Anti-GIP Antibody線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)
污黑腐皮殼鈉離子/?；悄懝厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-GJA1 Antibody線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)
糖化酵母生長抑14抗體Anti-GJA4 Antibody線粒體肌激1B(CKMT1B)
根白蟻傘碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體Anti-GJA3 Antibody線粒體肌激1A(CKMT1A)
匍枝根霉原變種肺表面活性蛋白D抗體Anti-GJA1 Antibody線粒體甘油-3-磷?；D(zhuǎn)移(GPAM)
斷裂諾氏菌血影蛋白A鏈紅型抗體Anti-GJB1 Antibody線粒體超氧化物歧化(SOD2)
蕈狀芽孢桿菌分選連接蛋白5抗體Anti-GJA5 Antibody線粒體GTP1(MTG1)
抑基因SSDP2抗體刺囊毛霉人支氣管平滑肌細(xì)胞
鯊烯環(huán)氧抗體休哈塔假絲酵母休哈塔亞種人直腸平滑肌細(xì)胞
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體棘孢木霉人小腸平滑肌細(xì)胞
同源轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白Sin3A抗體長枝木霉人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞
微量BCA蛋白定量試劑盒組織脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒20次人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷；NK-92 [NK92]小鼠抗心磷脂IgM（ACA-IgM）ELISA試劑盒,
植物脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒20次人B淋巴母；HMy2.CIR小鼠新生甲狀腺（NN-T4）ELISA試劑盒,
脂肪肝比色法定量檢測試劑盒人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷；NK-92MI [NK92MI]透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
細(xì)胞培養(yǎng)基片劑專題人臍靜脈內(nèi)皮；HUV-EC-C軍團(tuán)菌IgG（LP Ab-IgG）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
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