5-（4,6-二氯三嗪基）氨基熒光素實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
5-(4,6-二氯三嗪基)氨基熒光素	25 mg/100 mg	FSP132

產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)
?
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
?
使用方法：
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
人腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞報(bào)價(jià)p38γ MAPK Antibody20 ul

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞價(jià)格p38γ MAPK Antibody100 ul

人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)p38δ MAPK (10A8) Rabbit mAb20 ul

人腎癌組織源細(xì)胞報(bào)價(jià)p38δ MAPK (10A8) Rabbit mAb100 ul

大鼠嗅鞘細(xì)胞說明書γ-Catenin Antibody100 ul

小鼠食管上皮細(xì)胞說明書SirT1 Antibody100 ul

小鼠腸巨噬細(xì)胞報(bào)價(jià)TIE1 (D2K2T) Rabbit mAb100 ul

小鼠前列腺上皮細(xì)胞價(jià)格Phospho-Synapsin (Ser9) Antibody100 ul

小鼠前脂肪細(xì)胞價(jià)格Synapsin Antibody300 ul

小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody100 ul

EAC（小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞）說明書Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody100 ul

HT-29（人結(jié)腸癌細(xì)胞）說明書c-Jun (L70B11) Mouse mAb100 ul

Lec1（倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞）價(jià)格CDK9 (C12F7) Rabbit mAb20 ul

LoVo（人結(jié)腸癌細(xì)胞）說明書CDK9 (C12F7) Rabbit mAb100 ul

PANC-1（人胰腺癌細(xì)胞）說明書OGT (D1D8Q) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

TE-1（人食管癌細(xì)胞）說明書S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb100 ul

2V6.11（人胚腎細(xì)胞）說明書C/EBPδ Antibody20 ul
5-(4,6-二氯三嗪基)氨基熒光素Candida│krusei斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵制甘油。培養(yǎng)基: CM0375生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Marichromatium│sp.分離基物: 水樣/下表層海水其它安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 硫循環(huán)培養(yǎng)基: 1004生長(zhǎng)條件: 25-35℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Winogradskyella│sp.分離基物: 水樣/表層海水斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 污染物降解微生物/潛在石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

球形賴氨酸芽孢桿菌種屬: Lysinibacillus│sphaericus分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

煙曲霉種屬: Aspergillus fumigatus Fresenius凍干管，斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂：蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃，15min。121℃，15min。傳代方法: ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。

②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無(wú)菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。生長(zhǎng)條件: 25-28℃，好氧存儲(chǔ)條件: 2-8℃冷藏

Riemerella│anatipestifer分離基物: 鴨腦安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Aspergillus│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生理活性物質(zhì)，次核苷酸脫氫酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0018生長(zhǎng)條件: 26C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)；礦物油法；定期移植法

Kytococcus│sedentarius分離基物: 沉積物/TVG沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋放線菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

腸侵襲性大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli EIEC分離基物: 腹瀉病例糞便標(biāo)本凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。