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改良Barth溶液

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更新時間:2022-07-04 14:44:18瀏覽次數(shù):255

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號 FS-R6516 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6516
改良Barth溶液公司正在銷售的產品:兔超氧化物歧化酶1(SOD1)試劑盒Anti-FGF10 Antibody類固硫酸酯酶抗體
兔堿性唾液脯氨酸豐富蛋白2(PRB2)試劑盒 Anti-FGF10 Antibody固調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體
兔泛素蛋白(Ub)試劑盒 Anti-FGF13 Antibody轉運蛋白家族39成員7抗體
兔I型前膠原(PCI)試劑盒Anti-Fgf19(Fgf1

詳細介紹

產品分類:細胞組分分離

儲存條件:4℃,6個月

用途:漂洗卵母細胞

注意事項:主要由溶液A、溶液B、慶大霉素等混合而成。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規(guī)格

貨號

改良Barth溶液

500ml

FS-R6516

 

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

阿多(標準品) Dexamethasone AcetateCD44V5抗體包裝25g

阿侖磷鈉(標準品) Dexamethasone Acetate22號染色體開放閱讀框23抗體包裝5g

(標準品) Trimethoprim角蛋白19抗體包裝1g

阿西坦(標準品) Trimethoprim1號染色體開放閱讀框147抗體包裝5g

阿齊沙坦(標準品) Sivelestat sodium 膽固21-羥化抗體包裝1g

阿奇霉(標準品) Nevirapine畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端)包裝25g

阿米特(標準品) Nevirapine補體C1qL3鏈多肽抗體包裝5g

阿司咪唑(標準品) Sulfamethoxazole(SMZ)腫瘤/抗原27抗體(高遷移率族蛋白)包裝100g

阿糖腺苷(標準品) Sulfamethoxazole(SMZ)1號染色體開放閱讀框228抗體包裝25g

(標準品) Cefpirome Sulfate碳酐3抗體包裝5g

阿托伐醌,阿托喹(標準品) Cefpirome Sulfate親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIA抗體包裝1g

阿魏鈉(標準品) Amisulpride鈣網蛋白抗體包裝250mg

阿魏哌(標準品) Amisulpride腫瘤/抗原65包裝5g

阿西辛(標準品) Fenofibric acid2號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g

,阿西莫司(標準品) Fenofibric acid伴侶蛋白9抗體包裝5g

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格:>98.0%,BR,可用于培養(yǎng)血管生成4試劑盒Α-香樹脂;α-Amyrenone

沃遜納爾沙門氏菌Salmonella│wassenaar 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品血管生成2試劑盒相思豆;L-Abrine

: HBUM84819資源名稱: 鏈霉菌 質量規(guī)格:>98.5%血管生成1試劑盒相思子堿;L-Abrine
改良Barth溶液MTNR1A/MTR-1A /FITC  熒光標記褪黑受體1A/松果體受體1AIgG 98%

MTNR1B/MTNR-1B/FITC  熒光標記褪黑受體1BIgG ≥98%,FCC

mTOR/FITC  熒光標記雷帕霉靶蛋白IgG異 99%

mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC  熒光標記粘蛋白-1/上皮膜抗原IgG異 ≥98%,FCC

Muc2/FITC  熒光標記粘蛋白-2/上皮膜抗原2IgG5--2,3-己二酮 94%

mucin-3/Muc-3 /FITC  熒光標記粘蛋白-3IgG2--2-戊烯 99%

mucin4/Muc4/FITC  熒光標記粘蛋白-4IgG2--2-戊烯 ≥98%,FCC,FG

mucin 5B/Muc5B/FITC  熒光標記粘蛋白-5BIgG紅桔油 食品級


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