商品屬性:
商品介紹:
測(cè)定意義: 麥芽糖是由兩個(gè)葡萄糖單位經(jīng)由α-1,4糖苷鍵連接而成的二糖,又稱麥芽二糖。麥芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖類物質(zhì)在β-淀粉酶催化下的主要水解產(chǎn)物,再經(jīng)麥芽糖酶催化,則被水解成兩個(gè)葡萄糖分子。麥芽糖不僅參與了生物體內(nèi)糖代謝,其在食品和醫(yī)藥工業(yè)等行業(yè)也著廣泛應(yīng)用,是產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。 測(cè)定原理: 麥芽糖酶將樣品中麥芽糖水解為葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替bi林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulbactam Acid長壽相關(guān)基因lASS5抗體包裝5g
黃藤英文名: Arenobufagin長壽相關(guān)基因lASS3抗體包裝5g
黃芫花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Temsirolimus;CCI-779;NSC 683864腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體包裝100g
黃楊堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Rupatadine fumarate長壽相關(guān)基因lASS4抗體包裝25g
黃鐘花醌;帕 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Rupatadine fumarateRNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體包裝5g
灰氈毛忍冬皂苷英文名: Musk ketoneRNA結(jié)合蛋白LIN28抗體包裝1g
灰氈毛忍冬皂苷乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Midostaurin內(nèi)皮脂肪抗體包裝250mg
茴芹內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,10 –Phenanthroline anhydrous淋巴抗原6G抗體包裝100g
茴香腦英文名: 1,10-Phenanthroline hydrate富含亮膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體包裝25g
茴香對(duì)羥基乙酯英文名: 1,10-Phenanthroline hydrochloride monohydrate層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體包裝500g
火麻仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Carbetocin唾液過氧化物L(fēng)PO抗體包裝5g
火炭母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Naringenin 溶菌抗體包裝100g
雞蛋花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N(2),9-Diacetylguanine溶菌抗體包裝25g
雞冠花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: AlpinetinLAD1蛋白抗體包裝5g
雞內(nèi)金(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Epothilone A胸腺生成LAP2抗體包裝100g
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR抗腎上腺皮質(zhì)抗體試劑盒橄欖苦苷;Oleuropein
薄狀枝頂孢Acremonium│charticola 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一物抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體試劑盒佛手柑;Bergamotine
膜醭假絲酵母Candida│membranifaciens 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體試劑盒西紅柿堿;Tomatine
麥芽糖含量測(cè)試盒50管/24樣香菇 4-羥基喹唑啉蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)Elisa
草酸青霉 4-溴丁酸甲酯類鈣調(diào)磷酸B蛋白Elisa
假單胞屬 5--1-甲基-4-硝基咪唑纖維合成Elisa
果生鏈核盤 果糖二磷酸鈉水合物可溶性果膠Elisa
三棱孢小囊 粘KORRIGANElisa
米氏假單胞 2,4,6-三羥基苯甲端粒逆轉(zhuǎn)錄Elisa
解淀粉周培瑾氏 溴甲基喹啉酮; 4-溴甲基喹啉-2-酮還原型輔ⅠElisa
皺曲毛殼 3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡抗維生C氧化Elisa
鼠乳桿 2-苯并咪唑絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移Elisa
釀酒酵母 優(yōu)力膚(克羅他米通)β-半乳甘露聚糖Elisa
釀酒酵母 表雄酮β-半乳糖甘露聚糖Elisa
福氏志賀氏 n-已基三苯基膦NAD激Elisa
蠟狀芽孢桿 環(huán)戊基異酸酯NAD激Elisa
細(xì)鏈格孢 辛基膦酸末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移Elisa
澳型核果褐腐病 草甘薯病2Elisa