商品屬性:
商品介紹:
測(cè)定意義 半纖維素是植物細(xì)胞壁中與纖維素緊密結(jié)合的多糖混合物,是構(gòu)成細(xì)胞初生壁的主要成分,廣泛存在于植物中,是一種新型可利用能源。 測(cè)定原理 半纖維素經(jīng)酸處理后轉(zhuǎn)化成還原糖,與DNS生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,吸光值大反映了半纖維素含量。 需自備的儀器和用品、 天平、40目篩,恒溫水浴鍋、烘箱、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
鐵筷子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Crocin II雷帕霉靶蛋白抗體包裝5g
鐵皮石斛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tenuifolin粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體包裝100mg
鐵掃帚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Agrimol B粘蛋白4抗體包裝500mg
鐵莧菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sanguinarinev-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體包裝1g
葶藶子(播娘蒿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Vanillic acid基質(zhì)金屬蛋白-10抗體包裝250mg
葶藶子(獨(dú)行菜)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Vanillic acid突變型P53抗體包裝5g
通關(guān)藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Typhaneoside蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體包裝1g
通關(guān)藤苷G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside基質(zhì)金屬蛋白-24抗體包裝250mg
通關(guān)藤苷H(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sclareol巨噬甘露糖受體抗體包裝25g
通關(guān)藤苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Berberine胃粘液抗體包裝5g
麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Neobavaisoflavone基質(zhì)金屬蛋白20抗體包裝1g
頭花蓼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Neohesperidin尿調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝100g
透骨香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Neoandrographolide肌增強(qiáng)因子2抗體包裝25g
土貝母苷英文名: Neomangiferin肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝1g
土貝母苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Arbutin神經(jīng)母特異性轉(zhuǎn)移因子抗體包裝5g
亮白曲霉Aspergillus│candidus 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR軍團(tuán)菌抗體IgM試劑盒橙花;Nerol
平菇Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品軍團(tuán)菌抗體IgG試劑盒長(zhǎng)梗秦艽;Waltonitone
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%軍團(tuán)菌抗體IgA試劑盒長(zhǎng)春瑞濱;Vinorelbine
半纖維素含量測(cè)試盒100管/96樣腸炎沙門氏 3-(N-甲酰氨)苯基酸磷酸化酪羥化Elisa
大腸桿 5-(1-羧乙基)-2-(苯硫基)磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Elisa
弗氏志賀氏 氟尼酸磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
地衣芽胞桿 5-氟-2-三氟甲基芐磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
產(chǎn)色鏈霉 3-氟-5-甲氧基苯磷酸化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2Elisa
黃曲霉 5-磺基水楊酸鈉磷酸肌酸激Elisa
蠟狀芽孢桿 2-氨基-6-甲酸磷酸烯式酮酸羧激Elisa
尖孢鐮刀 醋酸奧曲肽磷脂肌3激Elisa
假單胞屬 苯基二酸二乙酯磷脂轉(zhuǎn)移蛋白Elisa
異常威克漢姆酵母 苯茚二酮硫酸肝糖蛋白2Elisa
馬勃 4-(4-吡啶基)硫氧還蛋白還原Elisa
伊氏副球 4-乙基吡唑硫氧化還原蛋白Elisa
洋蔥伯克霍爾德氏 2--3-氟-5-溴吡啶卵清蛋白特異性IgE抗體Elisa
金針菇(毛柄、冬菇) 氟鉻酸吡啶酯卵清蛋白特異性IgG抗體Elisa
大腸埃希氏(大腸桿) 環(huán)十二酮卵清蛋白特異性IgG1抗體Elisa