甜菜堿溶液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-S100A16 Antibody人抗白蛋白抗體
Anti-S100A5 Antibody小鼠補(bǔ)體片斷5a
Anti-S100A3 Antibody大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子
Anti-S100A7L2 Antibody小鼠補(bǔ)體片斷3a
Anti-S1PR1 Antibody人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體
Anti-S100Z Antibody大鼠巨噬炎癥蛋白5
An

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：PCR相關(guān)

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：增強(qiáng)PCR擴(kuò)增效率

注意事項(xiàng)：有超純進(jìn)口甜菜堿及超純水配置而成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）N-乙?；D(zhuǎn)移2抗體Human APOH(Beta-2-glycoprotein 1) ELISA Kit睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)

宇佐曲霉富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human FST(Follistatin) ELISA Kit結(jié)核菌(Tuberculin)

熱栗色鏈霉菌孤兒核受體TAK1抗體Human AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA Kit結(jié)核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)

玉米黑粉菌骨巢蛋白抗體Human COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA Kit結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)

峨眉山鏈霉菌軸突生長(zhǎng)誘向因子5抗體Human SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA Kit結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)

球孢白僵菌磷化p-IκB-α抗體Human PDGFC(Plaet-derived growth factor C) ELISA Kit結(jié)合珠蛋白(HPT)

枯草芽孢桿菌G21蛋白質(zhì)抗體Human INHA(Inhibin alpha chain) ELISA Kit結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)

暗黃紫鏈霉菌醌氧化還原抗體Human FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA Kit結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)

枯草芽孢桿菌神經(jīng)肽Y1受體抗體Human KitLG(Kit ligand) ELISA Kit結(jié)蛋白(Des)

淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種谷受體1抗體Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit結(jié)腸癌抗原(CCA)

佛羅里達(dá)側(cè)耳谷受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit窖蛋白(Cav-1)

溶血 水解1抗體Human CGA(Chromogranin A) ELISA Kit角化生長(zhǎng)因子(KGF)

雅致小克銀漢霉神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白抗體Human FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA Kit角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)

馬爾他布魯氏菌核孔蛋白50抗體Human FTL(Ferritin light chain) ELISA Kit膠轉(zhuǎn)蛋白(TAGLN)

鴨疫里氏桿菌軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-A抗體Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)

乳糖細(xì)黃鏈霉菌一氧化氮合成-1抗體（神經(jīng)型）Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)

嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格：國(guó)7-15 units/mg,來(lái)源于地衣芽孢桿菌黃楊堿

牛鏈球菌Streptococcus│bovis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR丁香

喜溫硫桿狀菌Acidithiobacillus│caldus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品黃芪皂苷III
甜菜堿溶液ER(Mouse Estradiol receptor) ELISA Kit  小鼠雌二chun受體規(guī)格： 48T

PTHrP(Mouse Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit  小鼠jia狀旁腺激su相關(guān)蛋白規(guī)格： 48T

LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit  小鼠ben丙氨suan規(guī)格： 48T

ACA-IgA(Mouse cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂IgA規(guī)格： 48T

ACA-IgM(Mouse cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit  小鼠抗心磷脂IgM規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。