詳細介紹
產品分類:細胞其他
儲存條件:4℃,3個月
用途:補充能量及水分
注意事項:無菌溶液,含乳酸鈉、氯化鈉、氯化鎂、果糖、葡萄糖等成分。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
轉化糖電解質溶液 | 500ml | FS-R6614 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
白茅根(標準品) Manganese dioxide磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體包裝500ml
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標準品) N,N'-Diphenylurea磷化轉錄因子ELK1抗體包裝25g
白皮杉-3'-O-葡萄糖苷 PEG 600磷化轉錄因子ELK1抗體包裝5g
白前(標準品) Prussian blue磷化雌激受體α抗體包裝1mg
白屈菜(標準品) Pyronin B磷化真核翻譯起始因子4B抗體包裝1g
白屈菜紅堿(標準品) X-Galactosamidide真核翻譯起始因子4B抗體包裝250mg
白芍(標準品) Fucoxanthin磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體包裝100g
白術(標準品) Brij 58磷化上皮癌轉化蛋白2抗體包裝25g
白術內酯III(標準品) Dithiooxamide磷化真核翻譯起始因子4G抗體包裝500g
白術內酯Ⅰ(標準品) DNase II, from Pocine Pancreas表皮生長因子受體5抗體包裝100g
白術內酯Ⅱ;蒼術內酯II(標準品) HEC, hydroxyethyl cellulose電子轉移黃蛋白β肽/黃蛋白抗體包裝25g
白頭翁(標準品) L-Aspartic acid sodium salt, monohydrate鈉通道蛋白α ENaC包裝500g
白頭翁皂苷A3(標準品) Lead granules轉錄因子E2F8抗體包裝1g
白頭翁皂苷B Mucin from bovine submaxillary glands內皮單核激活肽2抗體包裝5g
白頭翁皂苷B4(標準品) N,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC)外基質蛋白2抗體包裝25g
抵抗微桿菌Microbacterium│resistens 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品瞬時受體電位陽離子通道,亞科C,成員6試劑盒人參皂苷Rb2;GINSENOSIDE
白色假絲酵母菌Candida│albicans 質量規(guī)格:>900μg/mg, USP,BR閘蛋白14試劑盒人參皂苷Rb1;Ginsenoside
肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質量規(guī)格:標準品用于含量測定通道蛋白5試劑盒20(s)-人參皂苷Rg1;
轉化糖電解質溶液phospho-Tau protein (Ser396)/FITC 熒光標記化微管相關蛋白IgG
phospho-Tau protein (Ser422)/FITC 熒光標記化微管相關蛋白IgG
Tat/FITC 熒光標記酪氨轉氨IgG
TBX2/T-box2/FITC 熒光標記新型抑癌因IgG
TBX2/T-box2/FITC 熒光標記新型抑癌因IgG
TCF7L2/FITC 熒光標記轉錄因子7類似物2IgG
TCRG/FITC 熒光標記抗T受體γIgG
TDAG51/FITC 熒光標記TDAG51IgG