商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 動(dòng)物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。另外,氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對(duì)研究植物在不同條件下及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對(duì)氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營(yíng)養(yǎng)狀況等有重要意義。 測(cè)定原理: 氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,在570 nm有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定570 nm吸光度,來(lái)計(jì)算氨基酸含量。 自備儀器及用品: 臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、無(wú)水乙醇、冰和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
嗎啉惡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Caffeic acid磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
嗎貝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Caffeic acid微管結(jié)合蛋白CYLD抗體包裝100g
嗎替麥考酯/霉酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Caffeic acid磷化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體包裝25g
麥白霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Neomycin sulfate磷化CBX5抗體包裝5g
麥迪霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Neomycin sulfate霉抗體包裝100mg
麥芽三糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Diphenhydramine hydrochloride磷化受體酪激c-Abl抗體包裝1g
麥芽糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Diphenhydramine hydrochloride磷化質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體包裝500mg
沒(méi)食子乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Polyinosinic acid磷化周期依賴激2抗體包裝100g
霉; 麥考(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mildronate,Meldonium磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mildronate,Meldonium磷化周期依賴性激2抗體包裝5g
羅培南(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Carrageenan質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體包裝25g
洛西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pranlukast3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體包裝5g
洛昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Metoprolol tartrateCD134抗體包裝1g
索巴莫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Metoprolol tartrate單核趨化蛋白5抗體包裝5g
他多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Arabic gum髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體包裝100g
優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品色C-1試劑盒甜菊糖;Stevioside
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR色b561試劑盒特女貞苷;Specnuezhenide
假單胞菌屬Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品絨毛蛋白/埃茲蛋白試劑盒β-蛻皮激;Hydroxyecdyso
氨基酸(AA)含量測(cè)試盒100管/96樣黃桿 3-羥基異惡唑-5-甲酸甲酯ⅡaElisa
小孢根霉原變種 水合乙酸鋱(III), REacton髓樣分化蛋白2Elisa
中慢生根瘤 過(guò)氧化單硫酸鹽五型腺病抗原Elisa
溜曲霉 4,6-二氨基-2-甲硫基嘧啶破傷風(fēng)類IgG抗體Elisa
多孢木霉 氟化釩(IV)糖蛋白95Elisa
蘇云金芽胞桿 三氟釩肝結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子Elisa
臭曲霉 磷酸鉍(III)腦紅蛋白Elisa
小橢圓接合酵母 N,2-二甲基-3,3-二苯基-2-脂Elisa
歧皺青霉 2-巰基-4-氨基-6-羥基嘧啶抵抗樣分子βElisa
葉球鞘氨單胞 3-硝基-4-羥乙氨苯旋毛蟲(chóng)抗體Elisa
谷棒桿 環(huán)基萘啶羧酸血小板反應(yīng)蛋白2Elisa
干酪乳桿 2-基噻吩胰島抗原2Elisa
假單胞屬 異戊酸己酯抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體Elisa
微球 硫酸銪(III)十水合物, REacton甲狀腺球蛋白抗體Elisa
蘇云金芽孢桿松蠋亞種 硝酸鏑(III) 水合物抗磷脂抗體Elisa