LB固體培養(yǎng)基粉劑公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：兔載脂蛋白C4(ApoC4)試劑盒 Anti-CCR5 Antibody磷酸肌相互作用蛋白抗體
兔補(bǔ)體受體2 (CR2/CD21)試劑盒 Anti-CCR9 Antibody嘌呤核苷磷酸化酶抗體
兔纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒 Anti-CCR5 Antibody磷酸化蛋白激酶C/p-PKC ε抗體
兔核因子κB受體激活因子配基(RANκL)試劑盒Anti-

產(chǎn)品分類(lèi)：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  室溫,24個(gè)月

用途  zui經(jīng)典、zui通用的細(xì)菌培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基,本配方為L(zhǎng)B Miller的配方，含瓊脂。leagene推薦用于大腸桿菌培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)  主要由酵母提取物、胰蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等組成,如要求無(wú)菌,可高壓滅菌15～20min。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員2(TRPV2)TRPV2 ELISA Kit紅2,3 - 二磷甘油合成抗體包裝1g

轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TRPV1)TRPV1 ELISA Kit布氏桿菌菌體蛋白抗體包裝5g

轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員4(TRPM4)TRPM4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝100ml

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)TGFβI ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝500ml

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅱ(TGFβR2)TGFβR2 ELISA Kit多聚合苷激3磷化抗體包裝25ml

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)TGFβR1 ELISA Kit癌易感基因1抗體包裝1ml

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)TGFβ3 ELISA KitBcl-2同源拮抗劑抗體包裝5ml

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)TGFβ1 ELISA Kitβ3腎上腺能受體抗體包裝1g

主要堿性蛋白(MBP)MBP ELISA Kit腦鈉/鈉肽抗體包裝5g

軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)Ntn1 ELISA KitBZW2蛋白抗體包裝1g

周期依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)CDKN2A ELISA Kit緩激肽B1受體抗體包裝1g

周期依賴性激抑制因子1A(CDKN1A)CDKN1A ELISA Kit鈣激活通道蛋白α1抗體包裝250mg

周期依賴性激8(CDK8)CDK8 ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白2抗體包裝5g

重肽鐵蛋白(FTH)FTH ELISA Kit絲/蘇蛋白激SAD-B抗體包裝1g

腫廇蛋白P63(TP63)TP63 ELISA Kit鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝25g

去整合樣金屬蛋白19抗體肌肉生長(zhǎng)抑制(MSTN)FRAX597 is a potent, ATP-competitive inhibitor of group I PAKs with IC50 of 8 nM
LB固體培養(yǎng)基粉劑FANCF/FITC  熒光標(biāo)記范可貧血相關(guān)蛋白FIgG對(duì)酰氨 ，≥99.5%

FAS/FITC  熒光標(biāo)記FAS蛋白IgG對(duì)酰氨 藥用級(jí)

FASN/FITC  熒光標(biāo)記抗脂肪合成IgG鹽克侖特羅 98%,（劇品）

FasL/FITC  熒光標(biāo)記FasL蛋白IgG鹽克侖特羅 ，99.1%（劇品）

FAST kinase/FITC  熒光標(biāo)記抗Fas活化的絲/蘇氨激IgG鹽二雙胍  97%

FBN1 /FITC  熒光標(biāo)記原纖維蛋白1IgG間二芐 97%

Fc GammaR II A/CD32a/FITC  熒光標(biāo)記免疫球蛋白G Fc段受體ⅡIgG液體石蠟 USP級(jí)

FDC-SP/FITC  熒光標(biāo)記抗B淋巴表面結(jié)合蛋白IgG二酰 97%