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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632190 |
商品介紹：
測定意義： GOGAT廣泛分布于植物中，和谷氨酰胺合成酶共同構成GS/GOGAT循環(huán)，參與氨同化的調控。GOGAT分為以NADH為還原劑的NADH-GOGAT和以鐵氧還蛋白為還原劑的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT主要存在于葉綠體基質中，與光合作用和光呼吸有關，主要同化NO3-還原和光呼吸產(chǎn)生的NH4+。 測定原理： Fd-GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉移到α-酮戊二酸，形成兩分子的谷氨酸，谷氨酸脫氫酶催化谷氨酸的脫氫反應，同時產(chǎn)生NADH，使WST-8顯橙黃色，在450 nm下測定吸光值。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。喊凑战M織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
4-[2-(5-基吡-2-酰基)乙基]磺酰...英文名： Quetiapine Fumarate20號染色體開放閱讀框194抗體包裝250g
4-[2-(5--2-氧基酰)-乙基]-磺...英文名： Quetiapine Fumarate4號染色體開放閱讀框32抗體包裝50g
4-基安替比林（標準品）英文名： Raltegravir K5號染色體開放閱讀框20抗體包裝100g
4-羥基（標準品）英文名： Raltegravir胱抑D/半胱蛋白抑制劑D抗體包裝25g
4-羥基芐;對羥基(標準品)英文名： Rapamycin(Sirolimus)胱抑8/半胱蛋白抑制劑8抗體包裝10g
4-羥基間二（標準品）英文名： Rapamycin(Sirolimus)胱抑9/半胱蛋白抑制劑9抗體包裝50g
4-異丁基（標準品）英文名： Rasagiline Mesylate胱抑S/半胱蛋白抑制劑S抗體包裝1g
4－[2－（5--2－氧基酰）－乙基]－磺...英文名： Resveratrol煙堿型乙酰受體α3抗體包裝25g
4－差向四環(huán)（標準品）英文名： Resveratrol3號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
5'-脫氧-5-胞苷(5’-DFCR)(標準品)英文名： Retigabine Base3號染色體開放閱讀框39抗體包裝25g
5-基楊,沙秦(標準品)英文名： Retigabine3號染色體開放閱讀框59抗體包裝5g
5-基-2,4-戊二烯(標準品)英文名： Ribavirin5號染色體開放閱讀框51抗體包裝1g
5-氮胞苷/阿扎胞苷(標準品)英文名： Ribavirin3號染色體開放閱讀框70抗體包裝5g
5-基蜂蜜曲霉（標準品）英文名： Ribostamycin Sulfate2號染色體開放閱讀框68抗體包裝1g
5-羥基色(標準品)英文名： Rifabutin 2號染色體開放閱讀框47抗體包裝1g
酵母菌Saccharomyces│sp. 質量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)血小板膜糖蛋白Ⅳ試劑盒異甘草;Isoliquiritigen
原小單孢菌屬菌種Promicromonospora│sp. 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa試劑盒柚皮苷;Naringin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：>99%,BR血小板激活因子乙酰解2，質試劑盒延胡索乙;Tetrahydropalm
谷氨酸合成酶（GOGAT）測試盒50管/48樣臭曲霉 2,3,6-三氟芐生物羧化Elisa
熱帶假絲酵母 2-溴-3-羥基-6-音猬因子Elisa
微紅微球屬 4-甲氧基-2-硝基-苯甲蓋他病Elisa
白僵 1-苯基-1,2,3,4-四氫異喹啉Salusinβ蛋白Elisa
地衣芽孢桿 6-硝基-1,2-苯并異噻唑啉-3-酮 1,1-二氧化物可溶性因子受體Elisa
阿舒假囊酵母 N-乙酰基-3-甲β微球蛋白Elisa
米曲霉 4-三糖類抗原50Elisa
泡盛曲霉變種 5-硝基噻吩-2-羧酸糖類抗原199Elisa
植物乳桿 3-芐氧基苯甲酰肼糖類抗原153Elisa
核盤 硅化鎂糖類抗原242Elisa
溶血不動桿 順-6-壬烯糖類抗原724Elisa
短穩(wěn)桿 1-環(huán)戊烯基乙prestin 蛋白Elisa
異常漢遜酵母 2,3-二氫苯并-5-酸番茄紅Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-羥基甲酯色P45011B1Elisa
黑根霉 6-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉色P45011B2Elisa
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