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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321125 |
商品介紹：
測定意義哺乳動物CarE，也稱脂族酯酶（aliesterase），廣泛分布于組織和器官，屬于絲氨酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內(nèi)源性與外源性物質(zhì)水解，但不能催化水解乙酰膽堿及其類似物。CarE參與脂質(zhì)運輸和代謝，并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān)，有機磷農(nóng)藥可結(jié)合并且抑制CarE活性。測定原理CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，通過測定萘酯的生成速率即可計算出CarE的活性。實驗中所需儀器及設(shè)備可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水和無水乙醇。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
頭孢匹林鈉(標準品)英文名： GeniposideDYX1C1蛋白抗體包裝5g
頭孢羥芐 （標準品）英文名： GeniposideE3泛蛋白連接dzip3抗體包裝1g
頭孢曲松鈉（標準品）英文名： 17-Methyltestosterone三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體包裝250mg
頭孢噻吩（標準品）英文名： Tetrahydro-L-Biopterin free base多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體包裝5g
頭孢噻呋鈉(標準品)英文名： Tirofiban HCl三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體包裝100mg
頭孢噻肟鈉(標準品)英文名： Tirofiban HCl磷化三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體包裝1g
頭孢妥侖匹酯(標準品)英文名： Pullulan迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關(guān)蛋白抗體包裝500mg
頭孢西丁鈉（標準品）英文名： Vitamin E,dl-α-tocopherol雙氧化激活因子2抗體包裝5g
頭孢西?。^孢西?。藴势罚┯⑽拿?/span> StavudineRNA結(jié)合泛連接DZIP3抗體包裝100mg
頭孢唑啉(標準品)英文名： Stavudine二氫二脫氫1/2抗體包裝500mg
頭孢唑啉鈉（標準品）英文名： Moclobemide形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2抗體包裝1g
頭孢唑肟(標準品)英文名： Moclobemide質(zhì)分裂付出蛋白2抗體包裝5g
頭孢唑肟鈉(標準品)英文名： Astragaloside IV質(zhì)分裂付出蛋白4抗體包裝1g
土霉A(標準品)英文名： Astragaloside IV質(zhì)分裂付出蛋白5抗體包裝250mg
褪黑,松果體（標準品）英文名： Nateglinide淋巴抗原75抗體包裝50ml
: D8(1957)資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR維生D2試劑盒四氫小檗堿;Tetrahydroberb
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品維生C試劑盒蘇木;Hematoxylin
膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,可用于培養(yǎng)維生B6試劑盒雙醋瑞因;1,8-Diacetoxy-3
羧酸酯酶（CarE）測試盒50管/48樣豬丹絲 3-苯酮狀瘤病16型Elisa
卵孢木霉 異丁酸肉桂酯狀瘤病18型Elisa
蠟狀芽孢桿 丁酸苯乙酯鐵過氧化物岐化Elisa
聚生殼 2-氨基嘧啶-5-酸前血小板堿性蛋白Elisa
伊平屋橋大洋芽孢桿 3-叔丁基己二酸泛蛋白連接E3成分N-識別蛋白1Elisa
頂青霉 鄰甲基肉桂肝生長因子受體Elisa
耐久腸球 4'-溴苯酮拓撲異構(gòu)ⅡElisa
豇豆慢生根瘤 丁酸芐酯抗新喋呤抗體Elisa
硫磺 2-甲基-3-吡咯甲酸乙酯硫酸角質(zhì)Elisa
根瘤 異丁酸苯甲酯親核α2Elisa
Leminorella richardii 2-溴-4-DNAⅠ樣蛋白3Elisa
硝孢鏈霉 4-甲砜基苯乙酮Sorbin和含SH3結(jié)構(gòu)域的蛋白2Elisa
色串孢屬 高酸銅(II)六水合物增殖誘導(dǎo)配體Elisa
噬尼古丁節(jié)桿 水楊酰肼肽抑制劑16Elisa
直立枝孢 左乙西坦抑癌基因Beclin1Elisa
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