詳細(xì)介紹
商品介紹:
測定意義: 土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。 測定原理: 中性條件下,S-NPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);在680nm有特征吸收峰。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321301 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
Atopobium vaginae 磷化腎上腺能受體β2/β2-AR抗體Human LAYN ELISA Kit豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫試劑盒
釀酒酵母載脂蛋白D抗體Human LBR ELISA Kit豬鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2α(CAMK2A/CAMKA/KIAA0968)免疫試劑盒
黃青霉敏感離子通道1抗體Human LAYN ELISA Kit豬脯羥化(PHD)免疫試劑盒
齒孢青霉雙鏈RNA腺苷脫基抗體(C端)Human LCA5 ELISA Kit豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體Human LCE1A ELISA Kit豬肺炎支原體抗體(MP-Ab)免疫試劑盒
釀酒酵母腺苷環(huán)化1抗體Human LAX1 ELISA Kit豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種腺瘤樣息肉抗體Human LCE1A ELISA Kit豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
彩色豆馬勃溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移抗體Human LCK ELISA Kit豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒
新疆薄層菌錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human LCA5 ELISA Kit豬二氧化(DAO)免疫試劑盒
異常海桿狀菌磷化間變型淋巴瘤激抗體Human LBR ELISA Kit豬兒茶(CA)免疫試劑盒
異常畢赤酵母?;摎浜荛L鏈抗體Human LCE1B ELISA Kit豬多肽YY(PYY)免疫試劑盒
海膽橙色小單孢菌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體Human LARS ELISA Kit豬多巴(DA)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體Human LARS2 ELISA Kit豬端粒(TE)免疫試劑盒
CCTCC AB 2012479有絲分裂激B抗體Human LARS ELISA Kit豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母磷化Ack1抗體Human LAS1L ELISA Kit豬淀粉樣前體蛋白(βAPP)免疫試劑盒
牛邊緣無漿體(鎮(zhèn)原株)磷化Ack1抗體Human LARS2 ELISA Kit豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體1q試劑盒乙?;邹继J
簡單芽孢桿菌Bacillus│simplex 質(zhì)量規(guī)格:BR玻連蛋白試劑盒茵芋苷
樹舌5-1Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat. 質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BC波形蛋白試劑盒亞油酯
土壤中性蛋白酶(SNPT)測試盒100管/48樣紅曲霉 2-氟-6-苯甲組蛋白抗體Elisa
樟疫霉 2-氧代-4-苯基丁酸抗貓細(xì)小病抗體Elisa
阿舒假囊酵母 4-甲氧基-3-甲谷氨酰半胱合成Elisa
鏈球(不定種) 4'-氨甲基-5-羧基熒光酸性神經(jīng)鞘磷脂Elisa
枯草芽孢桿 1-乙基咪唑S轉(zhuǎn)移Elisa
異常威克漢姆酵母 4-溴-2-氟乙酰苯載脂蛋白C3Elisa
黃曲霉 2-(氨甲基)-3--5-三氟鹽酸鹽葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3Elisa
糙皮側(cè)耳 2--6-甲氧基胰十二指腸同源框-1基因Elisa
克魯維畢赤酵母 5-溴苯并-3-酮生長分化因子9Elisa
紅色野野村氏 2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸N-甲基-D-天門冬(NMDA)受體A1亞單位NR4Elisa
單胞 1-Boc-3-氨甲基氮雜環(huán)丁烷P物質(zhì)的受體Elisa
猴頭菇 4-咪唑乙酸鹽酸鹽結(jié)核桿抗原Elisa
谷棒桿 N-[(1,4-苯并二噁烷-2-基)羰基]哌鹽酸鹽胃蛋白IIElisa
解糖假蒼白桿 二乙酸根[(R)-(+)-2,2-二(二苯基膦基)-1,1-聯(lián)萘基]釕(II)生長分化因子11Elisa
翅Acetobacter senegalensis 3-(三氟甲基)苯酸頻哪酯CD13分子Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。