DNA中和緩沖液Ⅰ公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-RPL36 Antibody大鼠維生素B6
Anti-RPL35 Antibody小鼠血管緊張素原
Anti-RPL37 Antibody人抗髓磷脂抗體IgA
Anti-RPL37A Antibody小鼠熱休克蛋白60
Anti-RPL36 Antibody大鼠Ⅰ型膠原
Anti-RPL39 Antibody人抗突變型瓜波形蛋白抗體
Anti-RPL

產(chǎn)品分類：核酸雜交

儲存條件：室溫,12個月

用途：用于將DNA轉(zhuǎn)移至不帶電荷的膜上

注意事項(xiàng)：由tris-hcl、氯化鈉組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

芽孢桿菌屬胃動抗體Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗糖蛋白抗體(GP)

釀酒酵母甘露聚糖結(jié)合凝集抗體Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)

雙孢菇膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)

異常威克漢姆酵母結(jié)核分枝桿菌Ag85B抗體Human SERPINA6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)

大腸埃希菌磷化微管相關(guān)蛋白4抗體Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)

球孢白僵菌磷化微管相關(guān)蛋白4抗體Human NR1H2(Oxysterols receptor LXR-beta) ELISA Kit人抗鼠抗體(HAMA)

類布氏乳桿菌人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體Human UBR4(E3 ubiquitin-protein ligase UBR4) ELISA Kit人抗嗜中性粒胞漿抗體(ANCA)

礦泉水  鈣、鎂、、鈉、鍶、硒、偏硅  黑色瘤相關(guān)抗原G1/肝癌相關(guān)蛋白4抗體Human CRYAB(Alpha-crystallin B chain) ELISA Kit人抗腎小球基底膜抗體(GBM)

栗疫菌黑色瘤相關(guān)抗原B6抗體Human GLB1(Beta-galactosidase) ELISA Kit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)

巴氏醋桿菌黑色瘤相關(guān)抗原C2抗體Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)

釀酒酵母黑色瘤抗原樣基因2抗體Human HPR(Haptoglobin-related protein) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)

假交替單孢菌黑色瘤相關(guān)抗原C1抗體Human TALDO1(Transaldolase) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)

日本慢生根瘤菌黑色瘤相關(guān)抗原B2抗體Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗抗體(GM1)

運(yùn)動節(jié)桿菌黑色瘤相關(guān)抗原B4抗體Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)

鄉(xiāng)間布丘氏菌組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移抗體（腦膜瘤表達(dá)抗原5）Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)

葉點(diǎn)霉屬磷化微管相關(guān)蛋白4抗體Human COL4A1(Collagen alpha-1(IV) chain) ELISA Kit人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)

假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BR,70萬u/ml液體乙

柑橘綠霉病Penicillium│digitatum (Pers.) Sacc. 質(zhì)量規(guī)格：BR,活5萬,粉末

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：≥2000KU/mg protein,(牛胰)蘆丁
DNA中和緩沖液Ⅰhiston-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit  小鼠組蛋白H2b規(guī)格： 48T

VCAM-1/CD6(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1規(guī)格： 48T

GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit  小鼠糖皮質(zhì)類固chun受體規(guī)格： 48T

LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit  小鼠黃體生成su釋放激su規(guī)格： 48T

NGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit  小鼠腦紅蛋白規(guī)格： 48T