公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5是P450酶系的兩個(gè)血紅素蛋白,其比值的變化與P450代謝活性密切相關(guān)。 測(cè)定原理: 氧化型細(xì)胞色素b5經(jīng)連二亞硫酸鈉還原后,在424nm處有最大吸收峰,通過測(cè)定424nm和490nm處吸光值的差異,即可計(jì)算出細(xì)胞色素b5的含量。 自備儀器和用品: 普通離心機(jī),超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
遠(yuǎn)志-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: Tiapride hydrochloride鼻咽癌相關(guān)蛋白6抗體包裝5g
遠(yuǎn)志(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Methyl hesperidin神經(jīng)4抗體包裝25g
遠(yuǎn)志皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: MolsidomineN-乙?;咸烟羌た贵w包裝5g
遠(yuǎn)志皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Molsidomine核因子1B抗體包裝100g
遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mitotane;O,P'-DDD維誘導(dǎo)神經(jīng)母瘤蛋白1抗體包裝25g
月桂烯(香葉烯)英文名: Uracil 轉(zhuǎn)錄延伸因子NELF抗體包裝500g
月見草油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Uracil 蛋白激C結(jié)合蛋白NELL1抗體包裝100g
云實(shí)皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Propantheline bromide蛋白激C結(jié)合蛋白NELL2抗體包裝25g
蕓香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tulobuterol hydrochloride腦特異性跨膜蛋白抗體包裝5g
蕓香柚皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide核因子1A抗體包裝25g
皂角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Labetalol hydrochloride環(huán)一螺旋蛋白1抗體包裝5g
澤瀉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Salicylamide腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體包裝1g
澤瀉A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Feprazone神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體包裝5g
澤瀉A醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Anethole trithione軸突生長誘向因子4抗體包裝100g
澤瀉B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Anethole trithione脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體包裝25g
枯草芽孢桿菌Bacillus│sublitis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR狀旁腺激1-34試劑盒(-)-白雀木;L-Quebrachi
海紅色桿菌Erythrobacter│aquimaris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品狀旁腺激1-34試劑盒八氫姜黃;octahydrocurcu
: ivcas7.00793資源名稱: 球形賴芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%狀旁腺激試劑盒白楊-7-葡萄糖苷;Chrysin
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒100管/96樣嘴突凸臍蠕孢 5-氨基-1H-唑-3-甲酸足標(biāo)記蛋白;足盂蛋白Elisa
球毛殼* 6-羥基-2-萘甲組脫羧Elisa
金黃桿屬 3--4-氟三氟甲苯組Elisa
枯草芽孢桿 1-乙?;?4-乙酸組-N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
鈉線屬 5-溴-2-肼基吡啶組蛋白去乙?;疎lisa
萎蔫短小桿 3-(三氟甲基)肉桂酸組織蛋白BElisa
糙皮側(cè)耳 1-辛基磺酰組織蛋白KElisa
金龜子綠僵 檸檬酸三乙酯組織蛋白SElisa
稍黃鏈霉 檸檬酸二氫組織多肽抗原Elisa
戊糖乳桿 溴化鋇, Puratronic組織型纖溶原激活劑Elisa
枯草芽孢桿 偏磷酸喹啉酸Elisa
比克畢赤酵母 1,1,3-三乙氧基烷Glo蛋白Elisa
長根菇 溴化鎳(II)三水合物圓環(huán)病2型抗體Elisa
榨菜檸檬球 1-甲基-4-氨基-1H-吲唑漢坦病Elisa
粘紅酵母 溴化鈣結(jié)腸癌抗原Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。