公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類(lèi)水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類(lèi)酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。測(cè)定原理植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
熱帶假絲酵母17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體Human EIF2B4 ELISA Kit兔腎(Renin)免疫試劑盒
節(jié)桿菌17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框78抗體Human EIF1AX ELISA Kit兔腎上腺(EPI)免疫試劑盒
Pseudarthrobacter維甲調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體Human EIF3B ELISA Kit兔神經(jīng)型乙酰受體亞基α7(CHRNA7)免疫試劑盒
微桿菌17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體Human EIF3C ELISA Kit兔神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒
釀酒酵母17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框97抗體Human EIF1AD ELISA Kit兔色上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒
深藍(lán)鐮孢貓眼綜合征染色體候選基因1抗體Human EIF3D ELISA Kit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒
樹(shù)生黃單胞菌貓眼綜合征染色體候選基因6抗體Human EIF1AY ELISA Kit兔溶菌(LZM)免疫試劑盒
海洋桿菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2抗體Human EIF1B ELISA Kit兔熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
登木糖霉菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體Human EIF2A ELISA Kit兔熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒
芽胞桿菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框128抗體Human EIF2AK1 ELISA Kit兔去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒
釀酒酵母6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體Human EIF2S1(Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit 1) ELISA Kit兔前列腺F(PG-F)免疫試劑盒
高加索球孢鏈霉菌CCZ1蛋白抗體Human EIF2B1 ELISA Kit兔葡萄糖-6-磷-1-脫氫(G6PD)免疫試劑盒
中間氣單胞菌腦蛋白5抗體Human EIF2S2 ELISA Kit兔凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體Human EIF2S3 ELISA Kit兔凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
根霉屬20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體Human EIF3B ELISA Kit兔凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體Human EIF1AD ELISA Kit兔尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒
頂孢頭孢霉Acremonium│strictum W. Gams 質(zhì)量規(guī)格:>50%,BRSalusin Alpha試劑盒沒(méi)食子辛酯
紡錘單頂孢Monacrosporium│fusiformis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSAA/LDL復(fù)合物 沒(méi)食子酯
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BCS100鈣結(jié)合蛋白P試劑盒漏蘆甾
土壤植酸酶測(cè)試盒100管/48樣球孢白僵 雄烯二酮肌糖αElisa
黃色籃狀 Boc-L-炔基甘基質(zhì)金屬蛋白1Elisa
交角耳 BOC-D-炔基甘基質(zhì)金屬蛋白13Elisa
木耳 L--叔亮甲酯鹽酸鹽基質(zhì)金屬蛋白14Elisa
葉點(diǎn)霉 3-溴-5-硝基三氟甲苯基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
玫煙色棒束孢 三十六烷基質(zhì)金屬蛋白26Elisa
枯草芽孢桿 二十九烷基質(zhì)金屬蛋白3Elisa
樟疫霉 二十六烷基質(zhì)金屬蛋白4Elisa
平菇 4,6-二-2-甲硫基嘧啶基質(zhì)金屬蛋白8Elisa
熒光假單胞 6-氨基喹喔啉基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
鹽水海桿狀 二(β-D-木糖)基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1Elisa
毛殼 N-Boc-L-叔亮基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2Elisa
豬丹絲 1-溴-6-己烷基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3Elisa
禽分枝桿 環(huán)丁基鹽酸鹽基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4Elisa
彎曲乳桿(更名類(lèi)干酪乳桿) 1,6-二己烷基質(zhì)衍生因子1Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。