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線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒100管/96樣

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更新時間:2022-06-17 13:49:28瀏覽次數(shù):306

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號 AS6321147 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測方法 微量法
線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒100管/96樣公司正在銷售的產(chǎn)品:kappa輕鏈可變區(qū)抗體Donkey Anti-Goat IgG/FITC 熒光標(biāo)記驢抗羊IgG
誘導(dǎo)協(xié)同分子CD278抗體Donkey Anti-Guinea IgG/FITC 熒光標(biāo)記驢抗豚鼠IgG
白介31抗體rec Protein G/FITC 熒光標(biāo)記重組純化蛋白G
白介28A抗體rec Protein A/FIT

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用:

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒100管/96樣

微量法

100管/96樣

AS6321147

商品介紹:

商品介紹

測定意義:

CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標(biāo)之一。

配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進行狀況。

測定原理:

CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。

常見樣本處理方法:

1、血清(漿)樣品:直接檢測。

2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

產(chǎn)品優(yōu)點如下:

1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。

2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。

3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍

4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

測定步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

白頭翁皂苷E英文名: Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗體包裝5g

白頭翁皂苷E-1英文名: Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗體包裝1g

白頭翁皂苷E-2英文名: Strontium fluoride哺乳動物室管膜相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

白頭翁皂苷E-3英文名: Syringaldehyde內(nèi)皮粘附分子抗體包裝10g

白土苓(短柱肖菝契)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tetrazolium violet上皮有絲分裂蛋白抗體包裝50g

白土苓(華南肖菝葜)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-MethylindoleEmerin蛋白抗體包裝25g

白薇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信號調(diào)節(jié)激5抗體包裝5g

白鮮堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成員5抗體包裝1g

白鮮皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benzimidazole早期生長反應(yīng)蛋白2抗體包裝25g

白楊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Carboxypeptidase B磷化雌激受體β抗體包裝5g

白楊-7-O-龍膽二糖苷英文名: Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗體包裝1g

白英(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: dTDP微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

白芷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Galactose oxidase減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體包裝1g

百部(對葉百部)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突觸蛋白2抗體包裝25g

百部(直立百部)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lead (II) chloride延伸突觸蛋白1抗體包裝5g

40044=ATCC23908=CBS804.68=IFO12862=ISP資源名稱: 脆弱鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR通道蛋白4抗體試劑盒;Ginsenoside

出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品通道蛋白3試劑盒人參皂苷RD;Ginsenoside R

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR痘帶狀皰疹病IgM試劑盒人參皂苷RC;Ginsenoside R
線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒100管/96樣弗雷德里克斯堡假單胞 3--2-吡甲酸甲酯蛋白聚糖Elisa

小奧德蘑 1,3-雙(2-異基-2-基)苯堿性成纖維生長因子抗體Elisa

三骨菇 反式-4-(叔丁氧羰基氨基)環(huán)己基羧酸甘油二酯Elisa

桔青霉 4-氮雜-3-甲過氧化物體Elisa

喜寒犁頭霉 2-甲基丁酸-3-甲基丁酯核內(nèi)蛋白Elisa

胡椒枯萎病 富馬酸單甲酯結(jié)核桿抗原Elisa

短小芽孢桿 DL-二硫蘇糖銅鋅過氧化物岐化Elisa

筆狀地霉 2-甲基嗎啉趨化因子C-C-基元受體6Elisa

大腸埃希 亮叔丁酯鹽酸鹽磷酸化肝生長因子受體Elisa

鏈霉 咪唑并[1,2-a]吡啶分泌型堿性磷酸Elisa

大腸埃希氏 N-甲基-4-溴苯甲酰Smads2Elisa

黃芪葉桿 3-溴-4-氟Smads7Elisa

紅緣擬層孔 苯并惡唑糖蛋白AElisa

運動張樹政氏 乳糖酸鈉白蛋白抗體Elisa

奇異變形桿49005 鹽酸左電壓依賴性陰離子通道蛋白1Elisa

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。


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