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磷脂染色液

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更新時間:2022-07-25 16:05:05瀏覽次數(shù):379

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4×100ml
貨號 FS-R7014 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7014
磷脂染色液公司正在銷售的產(chǎn)品:雞凝血酶/抗凝血酶復(fù)合物(TAT)試劑盒Anti-CDH26 Antibody角蛋白18(多肽)
雞神經(jīng)生長因子 (NGF)試劑盒 Anti-CDH4 Antibody角蛋白18多肽抗原
雞平足蛋白(PDPN)試劑盒Anti-CDH7 Antibody角蛋白18抗原(C端)
雞肌腱蛋白C(TNC)試劑盒Anti-CDH6 Antibody角蛋白14抗原
雞周期素依賴

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

磷脂染色液

4×100ml

FS-R7014

產(chǎn)品分類:脂類染色

儲存條件:室溫,避光,12個月

用途:磷脂染色

注意事項:磷脂、神經(jīng)髓鞘磷脂和核蛋白呈藍黑色,胞質(zhì)呈灰黃色。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

大豆慢生根瘤菌末端補體復(fù)合物抗體Human CCNL1 ELISA Kit山羊白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

多殺性巴氏桿菌8號染色體開放閱讀框55抗體Human CD209 ELISA Kit山羊白介1α(IL-1α)免疫試劑盒

粗柄羊肚菌補體C4a+C4b蛋白抗體Human Cathepsin H ELISA Kit山羊白介18(IL-18)免疫試劑盒

大腸埃希菌CD44V7抗體Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit山羊白介12(IL-12/P40)免疫試劑盒

變灰鏈霉菌CD44V10抗體Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit山羊白介10(IL-10)免疫試劑盒

秀珍菇CD44V4抗體Human BTN3A1 (Butyrophilin Subfamily 3 Member A1) ELISA Kit山羊阿黑皮原(POMC)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌緊密連接蛋白4抗體Human BBX(HMG box transcription factor BBX) ELISA Kit山羊γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

盔形畢赤酵母6號染色體開放閱讀框140抗體Human BTNL2(Butyrophilin-like protein 2) ELISA Kit山羊β-脂蛋白(β-LP)免疫試劑盒

金橫裂鏈霉菌L型鈣通道蛋白抗體Human BCAS1 ELISA Kit山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒

乳明串珠菌電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體Human BTNL8 ( Butyrophilin-like protein 8) ELISA Kit山羊α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒

熱帶假絲酵母緊密連接蛋白3抗體Human BubR1 (MAD3/BUB1-related protein kinase) ELISA Kit山羊toll樣受體2(TLR2)免疫試劑盒

露濕粘座孢霉(或露濕漆斑菌)磷化原癌基因c-Jun抗體Human BCAT1/ECA39 ELISA Kit山羊M型肌激(CKM)免疫試劑盒

殼囊孢屬磷化原癌基因c-Jun抗體Human BCL2L10 ELISA Kit山羊C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒

穗狀平臍蠕孢1號染色體開放閱讀框86抗體Human BCL6(B-cell lymphoma 6 protein) ELISA Kit山羊C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

芽胞桿菌8號染色體開放閱讀框59抗體Human BRD9 (Bromodomain-containing protein 9) ELISA Kit山羊CD14分子(CDl4)免疫試劑盒

紫色直絲鏈霉菌磷化補體成分5受體1抗體Human C14orf28 (Dopamine receptor-interacting protein 1) ELISA Kit山羊Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫試劑盒

鴨瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRP2蛋白抗體試劑盒苦龍膽酯苷

芽孢桿菌屬菌種Bacillus│T. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激級P27蛋白試劑盒康普瑞磷二鈉

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:BRP0蛋白抗體試劑盒康普瑞
磷脂染色液NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit  人去jia腎上腺su規(guī)格: 48T

PGF(Human Prostaglandin F) ELISA Kit  人前列腺suF規(guī)格: 48T

PGE1(Human Prostaglandin E1) ELISA Kit  人前列腺suE規(guī)格: 48T

ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit  人內(nèi)皮su1規(guī)格: 48T

FSH(Human follicle-stimulating hormone) ELISA Kit  人促卵泡su規(guī)格: 48T

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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