詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:胞內(nèi)鈣掩蔽BAPTA, AM
貨號(hào):FSP070
產(chǎn)品規(guī)格:25 mg
分類:熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)分析檢測試劑盒PLD2 (E1Y9L) Rabbit mAb (IHC Specific)100 ul
小鼠催產(chǎn)素(OT)分析檢測試劑盒eIF5 (D5G9) Rabbit mAb100 ul
小鼠白介素18(IL-18)分析檢測試劑盒Vinculin (E1E9V) XP® Rabbit mAb20 ul
小鼠白介素17(IL-17)分析檢測試劑盒Vinculin (E1E9V) XP® Rabbit mAb500 ul
小鼠Smad1 分析檢測試劑盒SimpleChIP® Mouse PER1 Intron 1 Primers100 ul
小鼠Klotho 分析檢測試劑盒PLD2 (E1Y9G) Rabbit mAb1 Kit
兔降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)分析檢測試劑盒PathScan® Total BACE Sandwich Kit100 ul
兔兒茶酚(CA)分析檢測試劑盒Phospho-TRAF2 (Ser11) (E2B6L) Rabbit mAb1 Kit
兔白介素-5(IL-5)分析檢測試劑盒PathScan® Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) Sandwich Kit100 ul
豚鼠乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)分析檢測試劑盒CAMLG (D5L9J) Rabbit mAb100 ul
豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)分析檢測試劑盒eRF1 Antibody100 ul
豚鼠白三烯D4(LTD4)分析檢測試劑盒CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAb20 ul
人甲狀腺球蛋白(TG)分析檢測試劑盒CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAb100 ul
人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)分析檢測試劑盒Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb100 ul
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)分析檢測試劑盒PSMC3/TBP1 Antibody100 ul
人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)分析檢測試劑盒ATR (E1S3S) Rabbit mAb100 ul
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)分析檢測試劑盒Phospho-BMAL1 (Ser42) Antibody100 ul
胞內(nèi)鈣掩蔽BAPTA, AM Escherichia coli *0西林瓶,菌片安全等級(jí): 1模式菌株: 未知應(yīng)用領(lǐng)域: 用于基因克隆,可用于構(gòu)建克隆,藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn),具有鏈霉素抗性培養(yǎng)基: LB
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長條件: 37℃,有氧,LB存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存;運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸。
Pseudomonas│aeruginosa凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Marella│mediterranea分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)基: 745生長條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pestalotiopsis│zonata分離基物: 苦即花葉斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 內(nèi)生菌培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
Mortierella│isabellina凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Bacillus│thuringiensis Berliner斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 害蟲生物防治培養(yǎng)基: 141生長條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Mesorhizobium│huakuii凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用根瘤菌的固氮功能研究培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 219生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk分離基物: 核桃葉片斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法