RVG29/Pep-1-peg-HRP 辣根過氧化氫
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RVG29/Pep-1-peg-HRP 辣根過氧化氫
介紹:過氧化物,通常來源于辣根(因此稱辣根過氧化物),是檢驗試劑中的。該產品不但用于多個檢測,也運用于類(ELISA)試劑盒。過氧化物作為多個試劑盒顯色體系的關鍵成分,對試劑盒的質量有影響。
過氧化物催化以下反應: 2 H2O2 →O2+2H2O 這一類以鐵卟啉為輔基,所以屬血紅素蛋白質類(hemeProteins)。過氧化物在生物界分布廣,在的氧化還原過程中起的作用。 是以辣根為,經過水的抽提,硫酸銨和丙酮分級分離,再經鋅離子純化,透析除鹽,冷凍干燥,后制得的辣根過氧化物。 辣根過氧化物分子量在40,000左右,是一種含亞鐵血紅素的蛋白質,等電點7.2;易溶于水,溶解度為5%(W/V),溶液呈棕紅色,透明;也溶于0.58飽和度以下的硫酸銨溶液,而0.62飽和度以上則不溶。該適pH為7.0(對愈創(chuàng)木酚為氫給體而言)。在室溫下HRP在幾周內保持穩(wěn)定,加熱到63℃后15分鐘內穩(wěn)定。 辣根過氧化物氧化還原電勢很低,pH6.08時,E’0= -0.2070v;pH為7.71時,E’0= -0.5787v。 辣根過氧化物的作用機理可分以下幾步: 一,形成綠色有活性的一底物復合物Ⅰ: 一、二步,復合物Ⅰ轉變成紅色有活性的復合物Ⅱ: 復合物Ⅰ+AH→復合物Ⅱ+A 第三步,復合物Ⅱ被還原,釋放出: 第三步 AH:表示還原型氫供體。 在一定程度上復合物Ⅱ可自發(fā)地分解成HRP和產物(P),亦可與過量的過氧化氫形成無活性的復合物Ⅲ。
用途
1) RZ>3 活性 >250u/mg, 主要應用于學,是的過氧化。采用色譜純化技術以除去會影響學反應的同工B .
2) RZ>2 活性 >180u/mg ,主要應用于化學,我們的客戶也有將這個規(guī)格的產品應用于學研究的。此時,一個標準化的分析方法就變得尤為。
3) RZ>1 活性 >100u/mg,主要應用于血糖試紙和尿液分析試紙。
4) RZ>0.6 活性 >60u/mg ,主要應用于尿液分析試紙。
辣根過氧化物的活力測定方法有多種,主要原理介紹如下:
1、Rz值,提純工作的后幾步以及純溶液可用Rz值表明的純度。
403nm處的吸收代表血紅素輔基的吸收,275nm的吸收是蛋白質的吸收,結晶的HRP的Rz值為3.04。測定時的濃度為1毫克蛋白/毫升。
2、愈創(chuàng)木酚法:測k4[見反應式⑶]。以愈創(chuàng)木酚(鄰甲氧基酚,guaiacol)為氫給體,其反應如下:
四鄰甲氧基連酚有色產物四鄰甲氧基連酚(E470nm = 26.6mM-1·cm-1)生成的速度(dx/dt)與底物過氧化氫以及氫供體愈創(chuàng)木酚的濃度有關。方程如下:
e—濃度;
α0—氫供體起始濃度;
x0為過氧化氫的起始濃度。
如果測定的條件選擇成k4α0》k1x0,可以測得k1:
所以
所以:
—測定過程中底物減少的速度。
是采用測定k4的方法來判斷的純度。
上述測定Rz值和k4值的方法雖然比較簡單,但都不能測得的實際活力單位。測定過氧化物的傳統方法是連苯三酚試驗法,以過氧化氫為底物,在作用下,連苯三酚可形成紅棓酚(Purpurogallin),在430nm處測定產物的形成。用紅棓酚值(PZ)表示的活力。PZ表示在標準測定條件下1毫克所形成的紅棓酚微克數。
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,接受定制,提供核磁,HPLC,LCMS,GC圖譜 可放心使用;對于科研機構支持。提供產品的msds、結構式、性質、英文名、、作用/用途、分子式/化學式、密度、沸點、熔點等
溫馨提示:西安瑞禧生物供應產品用于科研,不能用于人體(wyf2019.12.12)