ME-180細(xì)胞,人子宮頸表皮癌細(xì)胞,細(xì)胞株細(xì)胞系,ATCC細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng):人子宮頸表皮癌細(xì)胞
代號(hào):ME-180
來(lái)源:美國(guó)ATCC
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞特性:這株細(xì)胞來(lái)源于一個(gè)細(xì)胞集落不規(guī)則沒(méi)有顯著角質(zhì)化的侵染性鱗狀細(xì)胞癌。 單層培養(yǎng)的細(xì)胞間可以觀察到帶狀連接,也注意到有細(xì)胞質(zhì)張力絲。 1970年發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。 腫瘤壞死因子(TNF)α抑制ME-180的生長(zhǎng)。 這株細(xì)胞含有人乳頭瘤病毒(HPV)DNA,與HPV-39的同源性高于HPV-18。
ME-180細(xì)胞培養(yǎng):
一、 復(fù)蘇
1. 把凍存管從液氮中取出來(lái),立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動(dòng)。液體都融化后(大概1-1.5分鐘),拿出來(lái)噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。
2. 把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來(lái)),1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
3. 把上清液倒掉,加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來(lái)。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動(dòng),使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。
4. 標(biāo)好細(xì)胞種類(lèi)和日期、培養(yǎng)人名字等,放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。
5. 3天換一次培養(yǎng)基。
二、 傳代
1. 培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2. 把原有培養(yǎng)基吸掉。
3. 加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細(xì)胞就行),消化1-2分鐘。
4. 細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5. 用移液槍吹打細(xì)胞,把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。
6. 把細(xì)胞吸到15ml的離心管中,1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7. 倒掉上清液,加1-2ml培養(yǎng)基,把細(xì)胞都吹起來(lái)。
8. 根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)把細(xì)胞傳到幾個(gè)培養(yǎng)皿中。一般,癌細(xì)胞分5個(gè),正常細(xì)胞傳3個(gè)。繼續(xù)培養(yǎng)。
三、 凍存
把細(xì)胞消化下來(lái)并離心(同上)。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來(lái),分裝到滅菌的凍存管中,靜止幾分鐘,寫(xiě)明細(xì)胞種類(lèi),凍存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃第二天,然后放到液氮灌中保存。
凍存液的配制: 70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。
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