大鼠脂多糖結(jié)合蛋白（LBP）ELISA試劑盒?  的在ELISA實(shí)驗(yàn)前的注意事項(xiàng)
1 仔細(xì)閱讀說明書
2 確定試劑盒在有效期內(nèi)
3 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）
4 標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存
5 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
6 根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7 按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑

DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南：
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4、一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度，建議一夜后孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。

大鼠脂多糖結(jié)合蛋白（LBP）ELISA試劑盒保存：

未開封的試劑盒應(yīng)儲存于2-8℃；開封后的酶標(biāo)板應(yīng)與干燥劑一起儲存于鋁箔袋中置于2-8℃保存。僅在此出儲存條件下，產(chǎn)品在有效期內(nèi)可正常使用。

濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準(zhǔn)。

剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

需準(zhǔn)備材料：

1．96孔不透明微孔板

2．碳酸鹽/碳酸氫鈉緩沖液中捕捉抗體，ph9.4，5-10μg/ml

3．洗滌緩沖液TBS（0.25M Tris，0.15M Nacl）或PBS（0.1M 磷酸鹽，0.15M Nacl；pH7.2）

4．封閉緩沖液包含0.05% Tween-20

5．一抗?jié)舛?.05-0.1μg/ml

6．HRP-偶合物濃度10-20ng/ml

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