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MEF細(xì)胞
上?；鄯f生物常年供應(yīng)大量細(xì)胞，涉及細(xì)胞有人正常細(xì)胞，人腫瘤細(xì)胞，動物正常細(xì)胞，動物腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞種類較多，本展臺無法一一體現(xiàn)，有意愿購買細(xì)胞的客戶請及時和銷售客服咨詢是否有您需要的細(xì)胞。
MEF細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:
常見的污染如下：
1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細(xì)胞生長影響明顯。
仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！
可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理
2、霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長，但時間長之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。
預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作
3、支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。
用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運(yùn)動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率。
5、真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
6、原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等
關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長 就是操作的問題。
也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
1、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒 或者 紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水
2、超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素
3、超凈臺的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染
4、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時即可進(jìn)入操作。
MEF細(xì)胞 相關(guān)高品質(zhì)細(xì)胞株細(xì)胞系主要有：
K562 1640 10% 慢性髓原白血病 懸浮
H128* DMEM 10% 小細(xì)胞肺癌 懸浮,集聚
H69 DMEM 10% 小細(xì)胞肺癌 懸浮
HS77 DMEM 10% 小細(xì)胞肺癌 懸浮
A549 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
LTEP-A2 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
SPC-A1* 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
D6 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
LAX 1640 10% 肺腺癌 皮樣
NCI-H460 DMEM 10% 大細(xì)胞肺癌 上皮樣
95-D 1640 10% 高轉(zhuǎn)移肺癌
Calu-3 DMEM 10% 肺腺癌
HCCLMS DMEM 10% 肝轉(zhuǎn)移癌 上皮樣
SMMC-7721* DMEM 10% 肝癌 上皮樣
BEL-7402 DMEM 10% 肝癌 上皮樣
BEL-7404 DMEM 10% 肝癌
BEL-7405 DMEM 10% 肝癌
QGY-7701 DMEM 10% 肝癌
QGY-7703 DMEM 10% 肝癌
QGY-Q3* DMEM 10% 肝癌 上皮樣
HepG2 DMEM 10% 肝癌
Hep3B DMEM 10% 肝癌
BGC-823 DMEM 10% 低分化胃腺癌
SGC-7901* 1640 10% 胃癌 上皮樣
ECA-109 DMEM 10% 食管癌
MNK-7* 1640 10% 乳癌 上皮樣
SK-BR-3* 1640 10% 乳腺腺癌 上皮樣
BT-474 DMEM 10%insulin（0.2U/ml） 乳癌 上皮樣,呈片狀
MCF-7* 1640/DMEM 10% 乳腺腺癌 上皮樣
ZR-75-1 1640 10% 乳癌 上皮樣
ZR-75-30 1640 10% 乳腺癌
MDA-MB-231 DMEM 10% 乳癌 Adherent，Epithelial
Bcap-37 DMEM 10% 乳腺癌
MDA-MB-435S DMEM 10% 乳腺管癌
T47D 1640 10%Insulin (0.2U/ml) 乳腺管癌
BT-20 1640 10% 乳癌
HBL-100 DMEM 10% 乳腺細(xì)胞
JEG 1640 10% 絨癌 上皮樣
JAR 1640 10% 絨癌 上皮樣
HeLa* 1640 10% 宮頸癌 上皮樣
HeLa-229 1640 10% 宮頸癌
HO-8910 DMEM 10% 卵巢癌
C200 1640 10% 卵巢癌
HT-29* 1640 10% 結(jié)直腸癌 Adherent，epithelial
Sw620 DMEM 10% 結(jié)腸癌
LoVo 1640 10% 結(jié)腸腺癌 上皮樣
Ls-174-T 1640 10% 結(jié)腸腺癌
HCT-8 1640 10% 回盲腸腺癌
HCE-8962 1640 10% 盲腸未分化癌
SHG-44 1640 10% 腦膠質(zhì)瘤 上皮樣
U-251 1640 10% 腦星形膠質(zhì)瘤
SK-N-SH 1640 10% 腦星形膠質(zhì)瘤
CNE 1640 10% 鼻咽癌
Jurkat 1640 10% 急性T細(xì)胞白血病 懸浮
Hut102 1640 10% 人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 懸浮
Hut-78 1640 10% 人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 懸浮
HL-60* 1640 10% 人原髓細(xì)胞白血病 懸浮
U937 1640 10% 組織細(xì)胞淋巴瘤
Raji 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
Namalwa 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
A431 10% F12 人表皮癌
SH-SY5Y MEM+F12（1:1）15% 人神經(jīng)瘤細(xì)胞
DU145* 1640 10% 前列腺癌 Adherent，epithelial
PC-13 1640 10% 前列腺癌
CL1 1640 10% 前列腺癌
ME12 1640 10% 前列腺癌
P69 1640 10% 前列腺癌
Tca-8113 1640 10% 舌癌 上皮樣
KB 1640 10% 空腔表皮樣癌
Hep-2 1640 10% 喉表皮樣癌
ACC-2 1640 10% 腺樣囊性癌
ACC-3 1640 10% 腺樣囊性癌
THP-1 1640 10% 單核細(xì)胞瘤
A375 1640 10% 惡性黑色素瘤
T-24 1640 10% 膀胱變異細(xì)胞癌
EJ 1640 10% 膀胱癌
ScaBER 1640 10% 膀胱鱗癌
PANC-1 DMEM 10% 胰腺癌
Bxpc-3 DMEM 10% 胰腺腺癌
EH-PAN1 DMEM+15%FBS 人原代胰腺癌
MG-63 DMEM 骨肉瘤 貼壁生長
U2OS DMEM 骨肉瘤 貼壁生長
HOS8603 DMEM(10%FBS) 骨肉瘤
LUXL-1 IMDM 交質(zhì)瘤
LUXL-2 IMDM 交質(zhì)瘤
786-O 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
A172 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
AGS 人胃癌細(xì)胞
AZ-521 人胃癌細(xì)胞
SW480 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
CaCo-2 人結(jié)腸癌細(xì)胞
HGC-27 人胃癌細(xì)胞
Hs 746T 人胃癌細(xì)胞
MGC80-3 人胃癌細(xì)胞
MKN-45 人胃癌細(xì)胞
NUGC-3 人胃癌細(xì)胞
SNU-638 人胃癌細(xì)胞
SNU-739 人肝癌細(xì)胞
Tca8113 人舌鱗癌細(xì)胞
U251 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
U-373MG 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
U-87 MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
OPM-2 人骨髓瘤細(xì)胞
NCI-H929 人骨髓瘤細(xì)胞
U266 人骨髓瘤細(xì)胞
CAL 27 人舌鱗癌細(xì)胞
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
5637 人膀胱癌細(xì)胞
SK-OV-3 人卵巢癌細(xì)胞
GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞
MKN-28 人胃癌細(xì)胞
NCI-N87 人胃癌細(xì)胞
QCY-7703 人肝癌細(xì)胞
HepG2.2.15 人肝癌細(xì)胞
HuH7 人肝癌細(xì)胞
