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3t3-l1 3T3-L1細胞株

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產(chǎn)品型號:

品       牌:ATCC

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

更新時間:2024-08-13 09:48:55瀏覽次數(shù):3434

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3t3-l1 3T3-L1細胞株 傳代:

吸棄原培養(yǎng)液

PBS洗一兩次

加入400ul0.125%胰酶(原代加0.05% EDTA)消化

轉(zhuǎn)動培養(yǎng)盤,保證整個盤面都被trypsin液潤過

吸棄trypsin37度消化3min-->以*培液(DMEM+10% FCS1/1000Biotin+1/1000泛酸鈣-->吸打(槍的吸力調(diào)至zui?。?,110接種,前后左右搖晃培養(yǎng)盤,細胞均勻后放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)(10%CO2 ,37度)

3t3-l1 3T3-L1細胞株 冷凍管解凍

取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。

3t3-l1 3T3-L1細胞株 培養(yǎng)經(jīng)常出現(xiàn)的問題

細胞出現(xiàn)脫落現(xiàn)象,加入誘導(dǎo)液后,操作一定要輕,尤其是加培養(yǎng)基,從培養(yǎng)板側(cè)壁流下

誘導(dǎo)分化初期培養(yǎng)基很容易變黃,這是正?,F(xiàn)象,若擔(dān)心過低的PH值過低損傷細胞,可以用點HEPES,或直接多加些培養(yǎng)基

染上的 也不知道是不是脂滴,而且很難看出細胞輪廓,這很可能是沒有分化成功,與用不用染細胞核無關(guān)。不染核,單用OIL RED就可顯著看到細胞輪廓和脂滴。分化成熟后的脂肪細胞,細胞核會被脂滴“擠”到靠近細胞膜的邊緣處。

光鏡下即可明顯區(qū)分出分化和未分化的細胞。

 

3t3-l1 3T3-L1細胞株 來源:慧穎細胞庫

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