現(xiàn)貨供應(yīng):LETP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞株 全國(guó)均可發(fā)貨,全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格
細(xì)胞名稱:LETP-a-2細(xì)胞
中文名稱:人肺腺癌類(lèi)細(xì)胞
細(xì)胞數(shù)量:1000000個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞傳代:1:3 傳代
細(xì)胞純度:94%
細(xì)胞活力:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
細(xì)胞凍存:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:LETP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞株只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
LETP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞株 培養(yǎng)客戶須知
(1)請(qǐng)客戶收到細(xì)胞產(chǎn)品后,立即對(duì)外包裝,細(xì)胞凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)瓶等拍照,如有疑問(wèn)或問(wèn)題,須在24小時(shí)內(nèi)通知上?;鄯f生物科技有限公司,提供照片和書(shū)面說(shuō)明
(2.)請(qǐng)客戶在收到復(fù)蘇細(xì)胞后,迅速將原裝的細(xì)胞瓶放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置,3-4小時(shí)后,再使用傳代(注:請(qǐng)客戶觀看細(xì)胞狀態(tài)后。如若細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿且貼壁好,也可靜止4小時(shí)左右后就傳代)
(3.)請(qǐng)使用新配制的培養(yǎng)體系
(4.)請(qǐng)客戶培養(yǎng)細(xì)胞前三天,須對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行拍照和注明時(shí)間,若細(xì)胞生長(zhǎng)存在質(zhì)量問(wèn)題,須向上海本公司提供細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)的照片和書(shū)面說(shuō)明。
(5.)請(qǐng)客戶仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),提前準(zhǔn)備好相應(yīng)的培養(yǎng)體系,避免造成細(xì)胞質(zhì)量問(wèn)題
注:(1),觀察細(xì)胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
(2),瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗或無(wú)雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
(3),有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。
細(xì)胞株傳代及凍存方法:
懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開(kāi)始脫落時(shí),倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
2)細(xì)胞株的凍存:
1. 取培養(yǎng)2~3天生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106~2×107/ml。
2. 在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時(shí),-20℃ 2小時(shí),然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。
3)細(xì)胞株的復(fù)蘇:復(fù)蘇時(shí),從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3小時(shí),待細(xì)胞帖壁后,倒去培養(yǎng)液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
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