庫存現(xiàn)貨,細胞飽滿,有光澤,狀態(tài)良好,復蘇周期短,售后跟蹤及時到位,傳代細胞,凍存細胞形式寄出293XL-hTLR9細胞,人胚腎細胞,盡在慧穎細胞庫
產(chǎn)品名稱:293XL-hTLR9細胞
中文名稱:293XL-hTLR9細胞為穩(wěn)定表達人TLR9基因的人胚腎細胞,來源于人胚腎
細胞形態(tài):上皮樣
生長狀態(tài):貼壁生長
培養(yǎng)基:DMEM 高糖90%, Fetal Bovine Serum 10%,Blasticidin 10μg/ml
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:不可以使用胰酶進行消化。去培養(yǎng)基,加入2ml新鮮培養(yǎng)基后,反復吹打,使細胞分散成單個細胞,重新接種。
傳化比例:1:5-1:10
換液時間:2-3天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
凍存密度:3-5 ×10^6/管,液氮保存
293XL-hTLR9細胞,人胚腎細胞操作常見問題1:
培養(yǎng)液pH對細胞生長的影響有哪些?
由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生不良的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。
但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些,偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,可把液體的pH稍微調得偏酸一些。培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。
293XL-hTLR9細胞,人胚腎細胞操作常見問題2:
細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎?
不見得!因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。
培養(yǎng)細胞每次進行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗細胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。
細胞中心通常使用的消化液濃度為:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多數(shù)細胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA這種消化液。
293XL-hTLR9細胞,人胚腎細胞操作常見問題3:
培養(yǎng)細胞狀態(tài)欠佳原因有哪些:
1、 培養(yǎng)基的新鮮程度:一般加入血清后的*培養(yǎng)基,2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活,影響細胞培養(yǎng)。
建議:*培養(yǎng)基一次不要配太多,200ml以下?;蚋鶕?jù)用量決定。
2、 細胞外源微生物的污染:細胞不宜長期體外培養(yǎng),因為外源微生物污染的幾率大大提高。易發(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的。影響細胞狀態(tài)。
建議:實驗前凍存一批細胞,隔幾個月重新復蘇。即保證實驗所用細胞代數(shù)*,又將外源污染的后果降到zui低。
3、 排除其他原因:如更換培養(yǎng)條件(血清、培養(yǎng)基等);使用器皿的潔凈程度;
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