公司提供2種形式的C6細(xì)胞,大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株:
一種是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,-80C也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;再者干冰運(yùn)輸需要額外添加運(yùn)費(fèi)(順豐)。
另一種是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,運(yùn)費(fèi)較低(聯(lián)邦或順豐)。
上?;鄯f生物科技有限公司坐落于美麗的嘉定南翔鎮(zhèn),2014年獲得澳洲BOVOGEN產(chǎn)品代理權(quán),2015年獲得德國(guó)SERANA產(chǎn)品總銷售權(quán),為國(guó)內(nèi)科研機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)動(dòng)物血清和蛋白產(chǎn)品。
慧穎生物為完善的產(chǎn)品供應(yīng)渠道和售后服務(wù)。我們力求工作*,在處理客戶的咨詢、訂購(gòu)、到貨、售后服務(wù)、等方面追求更專業(yè)、更快捷、更及時(shí)。
上?;鄯f生物的經(jīng)營(yíng)原則是“質(zhì)量*,誠(chéng)信*”,以“質(zhì)量是企業(yè)的生命,誠(chéng)信是經(jīng)營(yíng)的資本”為警醒,嚴(yán)把所售出商品的質(zhì)量關(guān),不做任何有損顧客利益的事情。
一直以來(lái)慧穎生物都為廣大科研工作者的工作提供材料或者是研究條件,我們是依托廣大科研工作者的信任才能發(fā)展至今,并且與廣大科研者的科研工作一直成長(zhǎng),我們對(duì)此一直非常感謝眾多的新老顧客,如今又是一年的試劑購(gòu)買旺季,我們素爾生物也是為了感謝并且回饋廣大新老顧客,特推出素爾熱賣動(dòng)物血清,確保正品,確保質(zhì)量穩(wěn)定,爭(zhēng)取批次間差異降到zui小,真正的讓您感到物有所值。素爾生物在此希望廣大科研工作的工作可以步步皆高,生活如意幸福。
慧穎細(xì)胞庫(kù)400種類細(xì)胞株細(xì)胞系,20多株耐藥株,超低折扣,種類涵蓋:成纖維細(xì)胞 長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞 長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞 小鼠乳腺癌細(xì)胞 人膀胱癌細(xì)胞 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人甲狀腺癌細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞 干細(xì)胞 結(jié)腸癌細(xì)胞 胃癌細(xì)胞 乳腺類細(xì)胞 等
以下為購(gòu)買細(xì)胞系后的售后小知識(shí):
1、CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?
定期(至少每?jī)芍芤淮危?以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之。
2、為何培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中, 顏色會(huì)偏暗紅色, 且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí), 可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。
3、各種細(xì)胞培養(yǎng)用的dish,flask是否均相同?
不同廠牌的dish 或flask, 其所coating 的polymer 不同, 制造程序亦不同, 雖對(duì)大部分細(xì)胞沒(méi)有太大之影響, 惟少數(shù)細(xì)胞則可能因使用廠牌不同之dish 或flask 而有顯著之生長(zhǎng)差異。
4、購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形? 購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后, 加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80℃太久。
我公司出售Elisa試劑盒,一抗,二抗,動(dòng)物血清,細(xì)胞株細(xì)胞系,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,日本三菱厭氧罐及安寧包系列,GE填料以及凝膠系列產(chǎn)品,質(zhì)粒以及質(zhì)粒搭建。
一個(gè)合格的質(zhì)粒含有以下組成部分:
復(fù)制起始位點(diǎn)Ori:即控制復(fù)制起始的位點(diǎn)。原核生物DNA分子中只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn),而真核生物DNA分子有多個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)。
抗生素抗性基因:可以便于篩選或檢測(cè),如Amp+ 、Kan+。
多克隆位點(diǎn)MCS:克隆攜帶外源基因片段。
P/E:?jiǎn)?dòng)子/增強(qiáng)子。
Terms:終止信號(hào)。
加poly(A)信號(hào):可以起到穩(wěn)定 mRNA 作用。
如何閱讀質(zhì)粒圖譜:
*步:首先看 Ori 的位置,了解質(zhì)粒的類型(原核/真核/穿梭質(zhì)粒)。
第二步:再看篩選標(biāo)記,如抗性,決定使用什么篩選標(biāo)記。
--Ampr 水解β-內(nèi)酰胺環(huán),解除氨芐的毒性;
--tetr 可以阻止四環(huán)素進(jìn)入細(xì)胞;
--camr 生成氯霉素羥乙酰基衍生物,使之失去毒性;
--neor(kanr) 氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 使G418(長(zhǎng)那霉素衍生物)失活;
--hygr 使潮霉素β失活。
第三步:看多克隆位點(diǎn)(MCS)。它具有多個(gè)限制酶的單一切點(diǎn),便于外源基因的插入。如果在這些位點(diǎn)外有外源基因的插入,會(huì)導(dǎo)致某種標(biāo)志基因的失活,從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源DNA插入片段大小。質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段。一般來(lái)說(shuō),外源DNA片段越長(zhǎng),越難插入,越不穩(wěn)定,轉(zhuǎn)化效率越低。
第五步:是否含有表達(dá)系統(tǒng)元件,即啟動(dòng)子-核糖體結(jié)合位點(diǎn)-克隆位點(diǎn)-轉(zhuǎn)錄終止信號(hào),這是用來(lái)區(qū)別克隆載體與表達(dá)載體。在克隆載體中加入一些與表達(dá)調(diào)控有關(guān)的元件即成為表達(dá)載體。選用哪種載體,要以實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑橐罁?jù)。
啟動(dòng)子:促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄的DNA序列,這個(gè)DNA區(qū)域常在基因或操縱子編碼順序的上游,是DNA分子上可以與RNApol特異性結(jié)合并使之開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的部位,但啟動(dòng)子本身不被轉(zhuǎn)錄。
增強(qiáng)子/沉默子:增強(qiáng)子為真核基因組(包括真核病毒基因組)中的一種具有增強(qiáng)鄰近基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程的調(diào)控序列,其作用與增強(qiáng)子所在的位置或方向無(wú)關(guān)(即在所調(diào)控基因上游或下游均可發(fā)揮作用)。/沉默子:負(fù)增強(qiáng)子,負(fù)調(diào)控序列。
核糖體結(jié)合位點(diǎn)/起始密碼/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖體的兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn),對(duì)于原核而言是AUG(起始密碼)和 SD序列。
轉(zhuǎn)錄終止順序(終止子)/翻譯終止密碼子:結(jié)構(gòu)基因的zui后一個(gè)外顯子中有一個(gè) AATAAA的保守序列,此位點(diǎn)down-stream有一段GT或T富豐區(qū),這2部分共同構(gòu)成poly(A)加尾信號(hào)。
為什么質(zhì)粒圖譜上有的箭頭順時(shí)針有的箭頭逆時(shí)針?那其實(shí)是代表兩條DNA鏈,即質(zhì)粒是環(huán)狀雙鏈 DNA,它的啟動(dòng)子等在其中一條鏈上,而它的抗性基因在另一條鏈上。
如何選擇載體
把目的基因通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞(受體細(xì)胞),需要運(yùn)載工具(交通工具)攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞,這種運(yùn)載工具就叫做載體(vector)?;蚬こ趟玫膙ector實(shí)際上是用來(lái)攜帶目的基因片段進(jìn)入受體細(xì)胞的 DNA。
選擇載體主要依據(jù)構(gòu)建的目的,同時(shí)要考慮載體中應(yīng)有合適的限制酶切位點(diǎn)。如果構(gòu)建的目的是要表達(dá)一個(gè)特定的基因,則要選擇合適的表達(dá)載體。
產(chǎn)品名稱:C6細(xì)胞
中文名稱:大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株
種屬:大鼠
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)|懸浮生長(zhǎng)|半貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮樣|成纖維樣|圓形|球形|梭形|不規(guī)則形態(tài)
周期:凍存細(xì)胞3-4個(gè)工作日發(fā)貨,復(fù)蘇細(xì)胞1-2周發(fā)貨
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,超低折扣價(jià)格,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
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ATCC細(xì)胞|癌細(xì)胞|復(fù)蘇細(xì)胞|貼壁細(xì)胞|國(guó)產(chǎn)細(xì)胞|正常細(xì)胞株|Sceiencell細(xì)胞|耐DDP細(xì)胞|耐藥株建系 盡在素爾生物 值得信賴
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A2780細(xì)胞 A2780/DDP細(xì)胞 MC38細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞 DC2.4細(xì)胞 HT-22細(xì)胞 HOS細(xì)胞 HEK-293-6E細(xì)胞 HK-2細(xì)胞 MC3T3-E1細(xì)胞 熱賣
C6細(xì)胞,大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株 細(xì)胞吹打經(jīng)驗(yàn)之談:
急速的反復(fù)吹打肯定容易產(chǎn)生泡沫,這對(duì)細(xì)胞不利,所以我們要盡量避免。在操作時(shí)盡量選用較大口的吸管,吸液時(shí)先將吸管內(nèi)空氣排空,再深入液面以下吸液,吹打細(xì)胞時(shí),盡量沿著壁吹出液體,操作輕柔,就可zui大程度避免泡沫的產(chǎn)生!
1.有一些細(xì)胞可以不用消化液就能夠吹打下來(lái)。個(gè)人認(rèn)為能不用消化液是的。譬如巨噬細(xì)胞。一直維持巨噬細(xì)胞,每次傳代都不用消化液,吹打的時(shí)候一般會(huì)用瓶?jī)?nèi)未換的剩余舊培養(yǎng)液,這樣比用新的培養(yǎng)基可以減少點(diǎn)泡沫的生成。當(dāng)然這個(gè)一定要求原培養(yǎng)基未被污染。
2. 吹打的時(shí)候我們都知道要一點(diǎn)挨著一點(diǎn)吹,這樣不會(huì)漏掉地方。而每次都會(huì)首先沿著兩條對(duì)角線的方向吹打,然后再按照橫著或者是豎著吹打。這樣就可以比較容易把細(xì)胞吹下來(lái),因?yàn)槭紫燃?xì)胞的各個(gè)方向都受力了,而且比較均勻,細(xì)胞比較容易下來(lái),而且對(duì)細(xì)胞形態(tài)的維護(hù)比較好。
3.對(duì)膠頭滴管的要求。膠頭滴管頭部是做成彎曲45度角的形狀,一般都是自己用止血鉗夾住頭部在酒精燈上燒彎。發(fā)現(xiàn),如果吹打的時(shí)候,滴管的頭部邊緣如果是和吹打平面平行的話,反而容易產(chǎn)生泡沫,貼在底部吹,也容易產(chǎn)生泡沫,是能夠有一個(gè)角度順著你吹打的方向和滴管*。并且稍微遠(yuǎn)離吹打面,這樣滴管內(nèi)的液體容易流出,阻力會(huì)減小,就不會(huì)產(chǎn)生那么多的泡沫了。
4.控制吹打的節(jié)奏,急速地吹打會(huì)很快地產(chǎn)生泡沫,用力越大,越容易產(chǎn)生。是能夠把握住自己的力度和節(jié)奏,有條不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的輕松程度為準(zhǔn),如果剛吹幾下很快就累的話,那就證明是節(jié)奏過(guò)快。吹完都不累的話那就是太慢力度也不夠。一般在吹完一遍時(shí)指頭發(fā)困會(huì)比較好。這樣的節(jié)奏能夠比較快速而且有效地完成。
覺(jué)得zui關(guān)鍵的操作是不要吹打到底。
培養(yǎng)細(xì)胞多年,避免氣泡產(chǎn)生要注意以下兩點(diǎn):
1 吹打用的培養(yǎng)基不能太少,如果只有1-2mL,氣泡難以避免;
2 吸管每次打出液體后立刻深入液面下吸取液體。
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